臭氧治療兔種植性VX-2瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究分為三部分：
　　 第一部分:兔肝臟、肌肉、皮下VX-2腫瘤模型的建立和對(duì)比研究
　　 目的:通過對(duì)肝臟、肌肉以及皮下不同部位兔VX-2腫瘤模型的建立和比較，尋求更適合于腫瘤經(jīng)皮介入治療的荷瘤動(dòng)物模型。
　　 方法:將54只新西蘭白兔隨機(jī)分為3組，第一組為皮下接種VX-2腫瘤（皮下組），第二組為肌肉內(nèi)接種VX-2腫瘤（肌肉組），第三組為肝臟接種VX-2腫瘤（肝臟組），術(shù)后12、16、20天均進(jìn)行CT灌注掃描

2、，測(cè)量腫瘤大小，每次各分別處死6只兔進(jìn)行病理觀察。對(duì)三組模型的建模手術(shù)時(shí)間、腫瘤體積及并發(fā)癥等情況進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:皮下組生長(zhǎng)最慢，肌肉組其次，肝臟組生長(zhǎng)最快，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，肝臟組第12天就可以形成長(zhǎng)徑約1 cm左右的腫塊，而皮下組需要20天才可以形成類似大小的腫塊，肌肉組則介于二者之間。三組建模所用時(shí)間分別為肝臟組5.54±0.51min，肌肉組1.02±0.20min，皮下組0.98±0.21min，肝臟組明顯較

3、長(zhǎng)。除了肝臟組出現(xiàn)腹水、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移及腹壁種植外，皮下組、肌肉組均無明顯影響模型的情況。
　　 結(jié)論:相比肝臟、皮下建模，兔肌肉內(nèi)VX-2腫瘤模型具有操作簡(jiǎn)單，成瘤穩(wěn)定，腫瘤生長(zhǎng)速度適中的優(yōu)點(diǎn)，更適合作為兔VX2瘤的經(jīng)皮介入治療模型。
　　 第二部分:臭氧瘤內(nèi)注射所致兔種植性VX-2瘤組織超微結(jié)構(gòu)改變的研究
　　 目的:研究瘤體內(nèi)注射不同濃度O3后兔VX-2瘤組織超微結(jié)構(gòu)的改變，以探討可以應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究/臨床應(yīng)用的O

4、3的安全有效濃度，并根據(jù)超微結(jié)構(gòu)改變持續(xù)的時(shí)間，推斷重復(fù)治療可能的(間)隔時(shí)間。
　　 方法:20只兔共分4組，對(duì)照組2只（C組），20％ O3、40％ O3及60％ O3治療組各6只(T20、T40、T60組)，直視下按瘤體積2倍量不同濃度的O2/O3混合氣體用注射器直接注入瘤體內(nèi)，對(duì)照組（僅模擬穿刺）及每個(gè)治療組各2只兔在實(shí)驗(yàn)完成后即刻取材，剩余的兔分別于術(shù)后第4、8天各處死2只取材、制片，用透射電鏡觀察。
　　 結(jié)

5、果:T20組:注射O3后即刻可見腫瘤細(xì)胞有輕微的損傷改變，線粒體輕微嵴溶解，少許線粒體呈球狀腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，部分核周間隙增寬，細(xì)胞間隙正常。T40組與T60組:注射O3后即刻均可見腫瘤細(xì)胞有明顯的損傷改變，表現(xiàn)為線粒體明顯腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，細(xì)胞核腫脹，核周間隙增寬，部分細(xì)胞膜崩裂，組織結(jié)構(gòu)崩解，術(shù)后第4天，可見大片壞死，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腫瘤細(xì)胞膜不完整，溶酶體線粒體形成（呈新月形黑顆粒）或線粒體溶解，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，部分胞漿溶解，細(xì)胞核不規(guī)則

6、，核周間隙擴(kuò)張，T60組更明顯。血管內(nèi)皮細(xì)胞也有損傷改變。3組的細(xì)胞損傷在術(shù)后第8天仍可觀察到，但呈逐漸修復(fù)的狀態(tài)。
　　 結(jié)論:兔VX-2瘤內(nèi)注射20％-60％的O3后，都會(huì)對(duì)腫瘤細(xì)胞、瘤內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷甚至死亡，20％的較輕微，40％-60％的O3都比較明顯，但綜合安全性及治療效果，40％的O3更安全，治療間隔以4-8天為宜。
　　 第三部分:不同濃度的臭氧治療兔種植性VX-2腫瘤療效的研究
　　 目的

7、:研究對(duì)比不同濃度O3直接經(jīng)皮注射對(duì)兔VX-2瘤的療效。
　　 材料與方法:新西蘭大白兔110只，隨機(jī)分為4組，對(duì)照組20只為A組（空針穿刺），治療組各30只:B組20ug/ml濃度O3、C組40ug/ml濃度O3及D組60ug/ml濃度O3，于腫瘤種植后2周后直視下進(jìn)行治療，A組僅模擬穿刺，B、C、D三組按腫瘤體積3倍量不同濃度的O3多點(diǎn)穿刺直接注入瘤體內(nèi)，術(shù)前均行CT灌注掃描，術(shù)后第4、8天行CT灌注掃描，測(cè)量腫瘤大小，并于

8、第8天CT灌注后后全部處死取腫瘤進(jìn)行病理觀察。
　　 結(jié)果:(1)體積:注射臭氧前A、B、C、D四組的平均體積分別為:0.53±0.46，1.02±1.10，0.71±0.62，0.70±0.39;注射臭氧后第4天A、B、C、D組的平均體積為:0.91±0.60，1.15±0.95，1.03±1.03，1.12±0.81;注射臭氧后第8天A、B、C、D組的平均體積，1.75±1.31，2.18±2.18，1.84±1.71，1.

9、54±1.02;(2)腫瘤生長(zhǎng)率:A、B、C、D四組V4/V0分別為:2.19±1.21，1.43±0.80，1.54±0.82，1.62±0.92;A、B、C、D四組V8/V4分別為:2.47±2.31，1.80±0.72，1.98±1.28，1.56±0.86;A、B、C、D四組V8/V0分別為:5.14±3.67，2.64±1.59，2.93±1.56，2.27±1.34。V4/V0結(jié)果顯示A、B兩組P=0.05，其余各組間比較P