氬氦刀冷凍治療新西蘭兔VX2肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分 CT引導(dǎo)下兔VX2肝癌模型的制作及綜合評(píng)估 目的:探討CT引導(dǎo)下兔VX2肝癌模型的制作及影像學(xué)和組織學(xué)評(píng)估。 方法:選擇新西蘭大白兔41只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(前期9只，后期32只)，采用CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺瘤組織塊種植于兔肝左中央葉。前期從左側(cè)肋緣進(jìn)針，術(shù)后未予抗感染;后期改為劍突下最大層面進(jìn)針，術(shù)后抗感染3天。分別于接種后1W、2W、3W、4W行CT增強(qiáng)掃描及組織學(xué)觀察。 結(jié)果:前期實(shí)驗(yàn)移植模型成瘤率為88.

2、9％，腹壁種植轉(zhuǎn)移率為55.6％，44.4％并發(fā)胸腔積液。后期實(shí)驗(yàn)肝癌移植模型成功率為93.7％，腹壁種植轉(zhuǎn)移率為10.5％，無并發(fā)胸腔積液。CT平掃瘤體為低密度或等密度，均勻強(qiáng)化(2W)或環(huán)狀強(qiáng)化(3W、4W)；靜脈期、延遲期呈低密度，但CT值較動(dòng)脈期無明顯下降。組織學(xué)上VX2為血管豐富的低分化鱗狀細(xì)胞癌，2W出現(xiàn)點(diǎn)灶狀凝固性壞死，3W出現(xiàn)肝內(nèi)轉(zhuǎn)移，4W出現(xiàn)大量凝固性壞死。自然生存時(shí)間為5W～9W，死亡原因主要為廣泛肺和腹腔轉(zhuǎn)移伴全身

3、衰竭。 結(jié)論:CT引導(dǎo)下兔VX2肝癌模型的制作成功率高，并發(fā)癥發(fā)生率低，進(jìn)行兔VX2肝癌模型介入治療實(shí)驗(yàn)研究宜選擇2W為宜。 第二部分氬氦刀冷凍治療引起的組織學(xué)變化 目的:本實(shí)驗(yàn)旨在通過觀察TCAP治療實(shí)驗(yàn)兔局部的病理學(xué)、超微結(jié)構(gòu)變化及免疫組化的變化，來探討TCAP的腫瘤治療機(jī)制，為臨床應(yīng)用TCAP治療實(shí)體瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)；同時(shí)對(duì)術(shù)中CT影像下冰球的有效冷凍范圍進(jìn)行進(jìn)一步探討。 方法:CT引導(dǎo)下成功造模兔V

4、X2肝癌模型30只，隨機(jī)分成6組。治療組(第4、第5、第6組)采用CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺TCAP。對(duì)照組穿刺置刀后未予冷凍治療。分別于術(shù)后1d、1w、2w殺死，取冷凍范圍內(nèi)的組織，行電鏡、HE和IHC染色，觀察組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)變化。同時(shí)將治療組病理壞死范圍與第二循環(huán)過程中冰球大小進(jìn)行對(duì)照研究(配對(duì)t檢驗(yàn))。 結(jié)果:光鏡下TCAP后腫瘤組織側(cè)與肝組織側(cè)呈現(xiàn)明顯的不同分帶，即以冷刀為中心，腫瘤側(cè)出現(xiàn)中央壞死區(qū)、凝固性壞死區(qū)和邊緣細(xì)胞部

5、分損傷區(qū)；肝組織側(cè)出現(xiàn)中央壞死區(qū)、中間組織再生炎癥區(qū)和邊緣細(xì)胞部分損傷區(qū)。術(shù)后1d肝組織側(cè)見炎細(xì)胞浸潤(rùn)，1W見肉芽組織和壞死肝細(xì)胞鈣化，2W見成熟肉芽組織、壞死肝細(xì)胞鈣化增多；而腫瘤側(cè)未見無此現(xiàn)象。邊緣細(xì)胞部分損傷區(qū)電鏡下見凋亡細(xì)胞，TUNEL染色細(xì)胞核陽性，但隨術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)陽性細(xì)胞數(shù)逐漸減少。治療組第1組、第2組術(shù)后病理壞死范圍與第二循環(huán)過程中冰球大小無顯著差異，第3組有顯著差異。 結(jié)論:TCAP能使有效冷凍手術(shù)范圍內(nèi)的腫瘤組