奈達(dá)鉑對人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株SKOV3-DDP的作用及其作用機(jī)制的初步研究.pdf

1、研究目的:觀察奈達(dá)鉑對人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌順鉑耐藥細(xì)胞株SKOV3/DDP細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響，初步研究奈達(dá)鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞的作用及潛在的作用機(jī)制，為順鉑耐藥卵巢癌的化療方案的選擇提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.體外培養(yǎng)SKOV3/DDP細(xì)胞株，反復(fù)間歇梯度濃度給予藥物順鉑，刺激維持凍存的SKOV3/DDP細(xì)胞耐藥性的穩(wěn)定，以提供良好的體外實(shí)驗(yàn)研究平臺(tái)及條件。
　　2.經(jīng)不同濃度梯度

2、的奈達(dá)鉑（2、4、8、16、24、32、64、96μg/ml）和順鉑(2、4、8、16、24、32、64、96μg/ml)分別作用SKOV3/DDP細(xì)胞株12h、24h、36h，采用MTT比色法檢測SKOV3/DDP的細(xì)胞增殖抑制情況。
　　3.經(jīng)不同濃度梯度的奈達(dá)鉑（8、16、24μg/ml）和順鉑（8、16、24μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞36h，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測SKOV3/DDP的細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期。
　　

3、結(jié)果:
　　1.奈達(dá)鉑及順鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的影響:奈達(dá)鉑及順鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞增殖有抑制作用。隨著奈達(dá)鉑與順鉑濃度的增加及作用時(shí)間的延長，細(xì)胞抑制率有增加的趨勢。奈達(dá)鉑（8、16、24、32、64及96μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞12h、24h后，各組間抑制率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);奈達(dá)鉑（2、4、8、16、24、32及64μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞36h后，各組間抑制率比較有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。順鉑（8、16、24、32、64及96μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞12h后，各組間抑制率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);順鉑(2、4、8、16、24、32及64μg/ml)作用SKOV3/DDP細(xì)胞24h后，各組間抑制率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);順鉑（2、4、8、16及24μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞36h后，各組間抑制率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　在16、24

5、、32、64及96μg/ml濃度組，奈達(dá)鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞分別作用12h、24h后，細(xì)胞增殖抑制率低于同濃度同作用時(shí)間的順鉑組（P＜0.05）;在2、4、8、16、24、32、64及96μg/ml濃度組，奈達(dá)鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞作用36h后，細(xì)胞增殖抑制率低于同濃度同作用時(shí)間的順鉑組(P＜0.05)。本實(shí)驗(yàn)研究提示奈達(dá)鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的抑制作用低于順鉑。
　　2.奈達(dá)鉑及順鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞凋亡

6、的影響:結(jié)果提示奈達(dá)鉑及順鉑對SKOV3/DDP有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，且隨著藥物濃度的增加，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率也逐漸增加(P＜0.05)。奈達(dá)鉑誘導(dǎo)SKOV3/DDP細(xì)胞凋亡率低于同濃度順鉑組(P＜0.05)。
　　3.奈達(dá)鉑及順鉑對SKOV3/DDP細(xì)胞周期的影響:結(jié)果提示奈達(dá)鉑及順鉑與空白對照組相比，可誘導(dǎo)SKOV3/DDP細(xì)胞周期阻滯在細(xì)胞周期的S期。奈達(dá)鉑（8、16、24μg/ml）作用SKOV3/DDP細(xì)胞36h后，G0/G1

7、期細(xì)胞所占比例逐漸減少，S期細(xì)胞所占比例逐漸增加，G2/M期細(xì)胞所占比例無明顯變化，但各濃度組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。順鉑(8、16、24μg/ml)作用SKOV3/DDP細(xì)胞36h后，G0/G1期細(xì)胞所占比例逐漸減少，S期細(xì)胞所占比例逐漸增加，G2/M期細(xì)胞所占比例無明顯變化，且各濃度組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.奈達(dá)鉑及順鉑均能抑制SKOV3/DDP的細(xì)胞增殖，抑制作用呈劑量—時(shí)間依