卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究.pdf

1、山東大學碩士學位論文卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究姓名：張珂申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：楊興升20050510山東火學碩士學位論文卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究碩士研究生：張珂導師：楊興升教授山東大掌齊魯醫(yī)院婦產(chǎn)科中文摘要目的：研究順鉑耐藥卵巢癌細胞系c0C1／DDP中多藥耐藥相關(guān)蛋白2(MRP21基因以及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶兀(GSTa)基因的表達，探討兩種基因的反義寡核苷酸對COCl／DDP細胞鉑類耐藥的逆轉(zhuǎn)作用。方法：

2、將人工合成的反義、錯義硫代脫氧寡核苷酸經(jīng)脂質(zhì)體包裹轉(zhuǎn)染COCI／DDP細胞后，用MTT體外藥敏檢測法觀察COCI／DDP細胞耐藥性的變化，應用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RTPCR)方法檢測多藥耐藥相關(guān)蛋白基因(MRP2)以及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶基因(GSh)mRNA水平表達的改變，同時通過Westernblotting的方法檢測兩種基因蛋白表達的變化。結(jié)果：(1)COCl／DDP細胞中，MRP2與GSTit基因均有表達，其mRNA相對表達值分別為

3、O42e005和078士013。而親代COCI細胞中兩種基因均無表達。(2)將GSh反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染COCl／DDP細胞后，GST兀的mRNA水平降低(PO05)，其蛋白表達明顯降低，順鉑對COCI／DDP細胞的抑制率明顯提高，具有顯著性差異(Po05)。(3)將MRP2反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染COCl／DDP細胞后，MRP2基因在mRNA水平(P005)及蛋白水平的表達均明顯下降，耐藥細胞的耐藥性降低(耐藥指數(shù))具有顯著差異。(4)轉(zhuǎn)染錯義寡