MicroRNA-16調(diào)控細胞周期對卵巢癌順鉑耐藥的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討MicroRNA-16通過調(diào)節(jié)靶基因CCND1及蛋白表達產(chǎn)物CyclinD1(細胞周期相關蛋白D1)，參與上皮性卵巢癌耐藥細胞周期調(diào)控進程，并研究其與順鉑耐藥的關系。
　　 方法:MicroRNA-16成體模擬物(mimics)及其陰性對照片段(negative control NC)以脂質(zhì)體Lipofectamine2000為載體成功轉染于人卵巢癌細胞順鉑耐藥株SKOV3/DDP細胞;實時熒光定量PCR檢測各實驗組細

2、胞中miR-16的相對表達量;四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測耐藥細胞株耐藥系數(shù)及轉染前后細胞順鉑的半數(shù)抑制濃度;流式細胞儀檢測轉染前后各組細胞細胞周期變化;Western-blot蛋白印跡法檢測細胞周期相關蛋白CyclinD1蛋白表達量的變化。應用SPSS17.0進行統(tǒng)計學分析，采用One-wayANOVA單因素方差分析，兩組組間比較均采用t檢驗，P＜0.05為差別有顯著性。
　　 結果:SKOV3/DDP細胞株的耐藥系數(shù)=

3、4.90; SKOV3/DDP細胞中miR-16表達水平較SKOV3細胞明顯降低，差異有顯著性意義(P=0.000)，轉染miR-16 mimics后SKOV3/DDP細胞中miR-16水平較轉染前明顯升高(P=0.001); SKOV3/DDP細胞轉染miR-16 mimics后，順鉑半數(shù)抑制濃度(10.69±1.08)與轉染NC細胞(18.23±2.10)相比明顯降低(P=0.001); SKOV3/DDP細胞成功轉染miR-16后

4、，G1期細胞所占比例上升，差異有顯著性意義(P＜0.01);在蛋白水平，耐藥株SKOV3/DDP較SKOV3細胞周期相關蛋白CyclinD1蛋白相對表達量明顯升高，轉染miR-16 mimics后CyclinD1相對表達量明顯下降，差異有顯著性意義(P＜0.01)。
　　 結論:microRNA-16可能通過調(diào)控靶向負性調(diào)控CCND1基因及其蛋白表達產(chǎn)物CyclinD1，參與上皮性卵巢癌細胞周期的進程，并逆轉卵巢癌耐藥細胞株的耐

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