補陽還五湯對腦缺血再灌注大鼠血管新生過程中VEGF、VEGFR-1的影響.pdf

1、　　目的：在血管內皮抑制素抑制血管新生的條件下,研究補陽還五湯作用于大腦中動脈栓塞腦缺血再灌注模型(Ischemia-Reperfusion ,I/R)大鼠,通過檢測血清中血管內皮生長因子(VEGF)和基質金屬蛋白酶(MMP-9)含量,海馬區(qū)VEGFR-1及微血管密度(MVD),探討補陽還五湯促進大腦中動脈 I/R模型大鼠缺血損傷區(qū)血管新生的機理,為補陽還五湯治療缺血性腦血管疾病的臨床應用提供理論基礎。
　　方法：采用“線栓法

2、”制作大鼠大腦中動脈栓塞I/R模型,動物分為空白對照組(空白組)、假手術組、模型組、血管內皮抑制素組(抑制素組)、補陽還五湯干預抑制素組(干預組)、補陽還五湯組(中藥組),每組15只。中藥組、干預組自造模前3天開始給予補陽還五湯濃縮液 15ml/kg體重灌胃,假手術組,模型組,抑制素組用等量生理鹽水灌胃,每日一次,至造模后 14天,連用17天；抑制素組、干預組造模前兩天在立體定位儀下用微量進樣器向側腦室注入血管內皮抑制素
　　

3、5μL,假手術組、模型組、中藥組給予等量生理鹽水,之后每隔 3天重復用藥一次,至第13天。再灌注第14天所有大鼠腹主動脈取血清,斷頭取腦。取大腦嗅球后6至11mm的腦組織,用酶聯(lián)免疫吸附法測定外周血 VEGF及MMP-9的含量,用免疫組化法測定海馬區(qū) VEGFR-1表達水平,計數(shù)CD34表達水平計算梗死部位微血管密度。
　　結果：
　　(1) 神經功能缺損評分,模型組顯著高于假手術組、空白組(P<0.01)；與模型組

4、相比：抑制素組大鼠神經功能缺損評分較高、中藥組評分低,但無統(tǒng)計學意義；
　　(2) 與模型組相比：抑制素組微血管密度降低(P<0.05)；干預組、中藥組微血管密度顯著升高(P<0.01)；
　　(3) 與模型組相比：抑制素組海馬區(qū)VEGFR-1較低(P<0.05)；干預組VEGFR-1表達水平升高(P<0.05)；中藥組VEGFR-1表達水平顯著升高(P<0.01)；(4) 與模型組相比：抑制素組血清VEGF、MMP

5、-9含量降低(P<0.01,P<0.05)；干預組血清VEGF、MMP-9含量升高(P<0.05,P<0.01)；
　　結論：
　　(1) 血管內皮抑制素能抑制腦組織VEGFR-1表達水平和外周血VEGF、MMP-9含量,同時減低梗死區(qū)微血管密度的增加程度。
　　(2) 補陽還五湯在腦缺血時的腦保護機制與其上調 VEGFR-1表達水平、及VEGF、MMP-9含量的作用有關。
　　(3) 對補陽還五

6、湯提取芳香水,并與水煎液減壓濃縮,能有效的保留原有藥材的有效成分,提高藥物的生物利用度,降低灌胃量,便于臨床用藥。
　　(4) 通過側腦室直接注射給藥可以使藥物直接進入側腦室,避免在體內流動過程中的損耗,且不用考慮血腦屏障的因素,操作簡便易行,且死亡率不高,具有實用性,在研究直接作用于腦神經的藥物時,是一種理想的辦法。
　　(5) 應用改進的線栓法制作大腦中動脈栓塞腦缺血再灌注大鼠模型,效果良好,神經功能缺損評分理想