基于中醫(yī)“標(biāo)本兼治”研究益智仁鹽炙“溫腎縮尿”作用機(jī)理.pdf

1、益智為姜科山姜屬植物益智AlpiniaoxyphyllaMiq.的干燥成熟果實(shí)，是中醫(yī)臨床常用的一味中藥。在國(guó)家“十一五”期間，基于益智仁“生品入脾，鹽炙入腎，生熟有別”的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)，我們對(duì)其展開(kāi)了系統(tǒng)深入的研究，初步闡明了益智仁“生品入脾·止瀉，鹽炙入腎·縮尿”中藥炮制理論的科學(xué)內(nèi)涵。
　　目的：
　　本課題在國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目“益智仁‘鹽炙入腎-溫腎縮尿’的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理研究”（30973941）的支持下，對(duì)益智

2、仁溫腎縮尿的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理進(jìn)行研究。前期以小鼠水負(fù)荷多尿模型為基礎(chǔ)，已完成鹽益智仁縮尿有效部位篩選和部分機(jī)理研究。本文在前期基礎(chǔ)上，建立兩種大鼠多尿模型對(duì)有效部位縮尿作用進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)，并按照中醫(yī)標(biāo)本兼治的用藥原則，設(shè)計(jì)“溫腎”為本，“縮尿”為標(biāo)藥理指標(biāo)，探討其作用機(jī)理。
　　方法：
　　采用文獻(xiàn)學(xué)、藥理學(xué)和化學(xué)相結(jié)合的手段開(kāi)展益智仁鹽炙“溫腎縮尿”作用機(jī)理研究。
　　1采用文獻(xiàn)學(xué)方法，整理回顧益智仁、多尿動(dòng)物模型

3、的現(xiàn)代研究進(jìn)展，為實(shí)驗(yàn)研究提供理論依據(jù)。
　　2采用藥理學(xué)方法，建立兩種大鼠多尿模型，對(duì)鹽益智仁有效部位縮尿作用進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)，并比較鹽炙前后作用差異。
　　3以腎陽(yáng)虛多尿模型為基礎(chǔ)，從臟器指數(shù)、病理形態(tài)變化、血清BUN、Cr含量和全血CD3/CD4/CD8表達(dá)等方面探討益智仁鹽炙“溫腎”作用；從“抗利尿激素-環(huán)磷酸腺苷-水通道蛋白”信號(hào)途徑研究“縮尿”作用機(jī)制。
　　4采用血清藥物化學(xué)方法，對(duì)鹽益智仁有效部位“入血成

4、分”進(jìn)行分離鑒別，并以其為指標(biāo)，比較益智仁鹽炙前后藥代動(dòng)力學(xué)變化，從體內(nèi)過(guò)程變化探討益智仁“生熟有別”科學(xué)內(nèi)涵。
　　結(jié)果：
　　1對(duì)水負(fù)荷多尿模型大鼠，益智仁石油醚部位在9g·kg-1劑量時(shí)能顯著降低其0～1h段尿量（P<0.01），延長(zhǎng)大鼠的首次排尿時(shí)間（P<0.05）；鹽炙后在4.5g·kg-1時(shí)就有顯著縮尿作用（P<0.01），鹽炙前后在18g·kg-1劑量時(shí)均能顯著降低水負(fù)荷大鼠6h排泄率（P<0.05）。對(duì)腎陽(yáng)虛

5、多尿模型大鼠，益智仁石油醚部位在9g·kg-1劑量時(shí)能顯著降低其24h尿量（P<0.05），鹽炙前后無(wú)顯著差異。
　　2益智仁石油醚部位對(duì)腎陽(yáng)虛多尿模型大鼠腎臟、脾臟、胸腺和睪丸指數(shù)的改變有顯著抑制作用（P<0.05～0.01），對(duì)模型大鼠腎臟和睪丸病理?yè)p傷有一定程度的改善，并且可以降低其血清BUN、Cr含量，增加外周血CD3+、CD3+CD4+相對(duì)量，降低CD3+CD8+相對(duì)量，對(duì)腎臟指數(shù)和病理改變的治療作用以鹽炙品為佳；益智仁

6、石油醚部位能顯著提高腎陽(yáng)虛多尿模型大鼠血漿AVP和cAMP含量，上調(diào)AQP-2mRNA和AVPR-V2mRNA在腎髓質(zhì)的表達(dá)，提高AQP-2和AVPR-V2蛋白的表達(dá)，且鹽炙后作用均明顯增強(qiáng)，輔料鹽起到協(xié)同增效作用。
　　3采用血清藥物化學(xué)方法和手段，分離鑒定出鹽益智仁石油醚部位的“入血成分”11，12-二羥基圓柚酮。鹽炙能加快機(jī)體對(duì)11，12-二羥基圓柚酮的吸收，增加其生物利用度。
　　結(jié)論：
　　益智仁溫腎縮尿作用

7、的物質(zhì)基礎(chǔ)是石油醚部位，輔料鹽起到協(xié)同增效作用。該部位可通過(guò)改善腎臟病理?yè)p傷程度，緩和腎臟排泄功能障礙，提高機(jī)體免疫力而達(dá)到“溫腎”作用；能促進(jìn)腎陽(yáng)虛多尿模型大鼠分泌和釋放AVP，使機(jī)體合成cAMP量增加，從而使腎臟集合管AQP-2蛋白的表達(dá)量上升，對(duì)水的通透性增強(qiáng)達(dá)到“縮尿”作用。益智仁鹽炙后“溫腎縮尿”作用增強(qiáng)，可能與鹽炙能加快“入血成分”11，12-二羥基圓柚酮的吸收，增加其生物利用度有關(guān)。
　　創(chuàng)新點(diǎn)：
　　本文在中

8、醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法，開(kāi)展益智仁鹽炙前后溫腎縮尿作用的研究，其創(chuàng)新性如下：
　　1從中醫(yī)整體觀出發(fā)，設(shè)計(jì)“溫腎”為本，“縮尿”為標(biāo)的藥理指標(biāo)，充分體現(xiàn)中醫(yī)“標(biāo)本兼治”的用藥原則，為中藥及復(fù)方的研究提供一種思路。
　　2從AQP-2基因和蛋白水平進(jìn)一步揭示了益智仁鹽炙“縮尿”作用機(jī)制。
　　3從體內(nèi)過(guò)程角度闡明益智仁“生熟有別”，進(jìn)一步完善了益智仁“鹽炙入腎”科學(xué)內(nèi)涵。
　　4在小鼠飼養(yǎng)籠基礎(chǔ)上進(jìn)