益智仁健腦的神經(jīng)保護作用藥效物質篩選.pdf

1、中藥益智仁，又名益智、益智子，姜科、山姜屬的多年生草本植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的果實，收載于《中國藥典》2015版，為衛(wèi)生部101個首批藥食同源品種，為我國四大南藥之一。益智具有補腎、攝唾、固精、縮尿的功效。按照“腦為髓?！钡恼f法，我們查閱文獻發(fā)現(xiàn)，補腎藥物多有神經(jīng)保護、提高智力的作用。而益智仁，民間稱謂“益智”，有用于提高記憶力的記載。因此，我們對益智中有效成分進行提取分離鑒定和神經(jīng)保護藥效篩選，并進行機制

2、探討。
　　我們從益智仁中提取了白楊素、圓柚酮、楊芽黃素等6種主要成分。采用我們課題組前期構建啟動子篩選模型進行初篩的結果顯示:白楊素的最佳濃度是1μM，可以將NF（神經(jīng)因子）啟動子上調(diào)2.21倍。圓柚酮的最佳濃度是1μM，可以將NF啟動子上調(diào)2.3倍。楊芽黃素的最佳濃度是1μM，可以將NF啟動子上調(diào)1.6倍。在此基礎上我們以大鼠骨髓間充質干細胞(rMSCs)為模型細胞進行神經(jīng)保護功能的進一步驗證。實時定量PCR的結果顯示，白楊素

3、、圓柚酮這2種單體在1μM的濃度下，均能夠一定程度上促進五種神經(jīng)標志物的轉錄水平，并體現(xiàn)出一定的劑量依賴性。在給藥72h的時候mRNA的轉錄水平達到高峰，效果優(yōu)于陽性對照（全反式維甲酸）。免疫熒光的實驗表明，在骨髓間充質干細胞被誘導72h的時候，五種神經(jīng)標志物所對應的蛋白也均被檢測到。由此可見，這兩種化合物具有一定的誘導骨髓間充質干細胞向神經(jīng)細胞分化的能力。
　　本研究通過篩選，初步確認了來自中藥益智仁的兩種可以誘導干細胞向神經(jīng)細