CD44抗體(HI44a)對HL-60細(xì)胞體外增殖分化作用的研究.pdf

1、目的：探討CD44抗體HI44a對急性髓系白血病細(xì)胞株HL-60增殖分化的作用機(jī)制。 方法：應(yīng)用RT-PCR方法檢測各型血液系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞株(HL-60、NB4、CA46、U266、K562、KAR、CEM、U937及JURKAT)的CD44 mRNA表達(dá)水平；以急性髓系白血病細(xì)胞株HL-60為研究對象，以ATRA為陽性對照，以同型抗體IgG2a為陰性對照，應(yīng)用臺盼蘭拒染法檢測HI44a對HL-60細(xì)胞增殖的影響，應(yīng)用瑞氏染色

2、法及流式細(xì)胞學(xué)檢測HI44a對HL-60細(xì)胞分化的影響，應(yīng)用RT-PCR及熒光定量RT-PCR法檢測HI44a處理HL-60細(xì)胞前后髓系分化相關(guān)的細(xì)胞因子及受體信號通路(IL-3Rα、GM-CSFRα、Hβc、HOPN、CD44、TGFβ1、TGFβR1、smad4)基因表達(dá)變化，應(yīng)用DNA序列分析法檢測HI44a處理HL-60細(xì)胞前后OPN異構(gòu)體改變。 結(jié)果：在各型血液系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞株中，以急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4及

3、急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株U937的CD44 mRNA表達(dá)水平最高；經(jīng)HI44a作用后，HL-60細(xì)胞增殖受抑；細(xì)胞形態(tài)變化表現(xiàn)為體積變大，核固縮，核漿比例降低，核仁減少，出現(xiàn)核分葉等特征；細(xì)胞表面分化抗原CD15表達(dá)上調(diào)：HI44a作用后，HL-60細(xì)胞的GM-CSFRα及TGFβ1 mRNA表達(dá)水平增高，而OPN mRNA表達(dá)水平降低，IL-3Rα、Hβc、TGFβR1、smad4 mRNA表達(dá)水平無明顯變化；OPN序列分析結(jié)果表明H