小麥抗蠕孢菌葉枯病微衛(wèi)星標(biāo)記檢測.pdf

1、本文主要是對小麥F<,2>代不同雜交群體抗蠕孢菌(Bipolaris sorokiniana)葉枯病的抗病性差異以及利用SSR分子標(biāo)記初步確定小麥葉枯病抗病QTL的研究。主要研究內(nèi)容如下： (1)構(gòu)建F2雜交群體，篩選研究材料。 (2)通過對小麥F2代不同雜交群體抗蠕孢菌葉枯病抗病性差異研究，計算F2代病情指數(shù)和)c2檢驗，分析其對抗蠕孢菌葉枯病的遺傳特點。 (3)SSR引物的選擇以及在抗感親本及其后代之間的檢測

2、。 (4)初步確定小麥抗蠕孢菌葉枯病遺傳圖譜構(gòu)建可用的SSR引物。 在小麥不同生育期抗蠕孢菌葉枯病的抗病性鑒定研究發(fā)現(xiàn)，在田間試驗中，抗病品種和感病品種的旗葉與旗下葉發(fā)病程度有較大差異，而其共同表現(xiàn)為旗葉發(fā)病較旗下葉慢，并且比旗下葉要輕；在溫室離體葉片抗病性研究中發(fā)現(xiàn)不同小麥品種之間蠕孢菌(B．sorokiniana)在寄主小麥的潛育期和寄主小麥的病斑長度、病斑寬度以及病斑單位面積產(chǎn)孢量都表現(xiàn)極顯著差異；苗期與抽穗期之間

3、寄主小麥的病斑寬度差異不明顯，而且B．sorokiniana在不同小麥品種上的潛育期差異也不明顯。 采用抗葉枯病小麥蘇聯(lián)528、畢85-7和豫麥9與感病品種中國春配制雜交，發(fā)現(xiàn)這3份材料含有的抗蠕孢菌葉枯病基因為顯性。對雜交組合F2植株進行了抗葉枯鑒定和X<'2>檢驗，表明畢85-7和豫麥9所攜帶的抗病基因與蘇聯(lián)528不同。通過反交組合進行抗病鑒定，中國春×畢85-7和其正交組合產(chǎn)生差異，表明中國春材料中可能含有葉枯病隱性基因。

4、其它組合反交的分離比沒有發(fā)生變化，與材料中國春抗葉枯病隱性基因沒有表達(dá)有關(guān)。 基于PCR技術(shù)的SSR標(biāo)記以其多態(tài)性高、標(biāo)記共顯性、技術(shù)簡便、快速、穩(wěn)定性高、等位基因多樣性的特點，在許多小麥病害抗病基因研究中所應(yīng)用。SSR標(biāo)記適用于小麥Q(jìng)TL定位研究，便于在育種中對有關(guān)的QTL的遺傳動態(tài)進行跟蹤，從而大大增強人們對數(shù)量性狀的遺傳操縱能力，提高育種中對數(shù)量性狀優(yōu)良基因型選擇的準(zhǔn)確性和預(yù)見性。所以本實驗采用Rder等人開發(fā)的S

5、SR標(biāo)記對葉枯病抗性QTL進行標(biāo)記，標(biāo)記主要集中于3B、3D、7B等幾條染色體，種類包括：Xgwm、Xgdm、Xbarc、Xfcp、Xwmc五種，共21對引物。采用1個雜交群體蘇聯(lián)528x中國春。提取基因組DNA進行PCR擴增和聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，并通過改進PCR體系獲得具有多態(tài)性的標(biāo)記，檢測引物在親本和雜交組合問擴增出的特異性DNA片段，其中有4對引物在抗感親本間擴增出多態(tài)性，多態(tài)性頻率19％。這4對引物為Xgwm573、Xgwm