旋轉磁場對小鼠骨髓型急性放射病治療作用的研究.pdf

1、在核戰(zhàn)爭或核輻射事故條件下以及腫瘤的放射治療中，都可能引起急性放射病（acuteradiationsyndrome,ARS），因此，急性放射病的治療一直受到各國學者的高度重視，并成為軍事醫(yī)學和放射醫(yī)學研究的重要內(nèi)容。造血損傷是急性放射病的基本損傷，如何減輕造血損傷并促進其恢復，是提高急性放射病治療水平的關鍵之一。磁場，作為一種特殊的物理因子，可促進成骨細胞的增殖與分化、增加成骨細胞生長因子如骨堿性磷酸酶（bonealkalinephos

2、phatase,BAP）等的合成與分泌、促進成骨細胞細胞外基質(zhì)的合成與分泌；而成骨細胞又是骨髓造血微環(huán)境的重要組成成分。近期研究報告更指出成骨細胞是組成造血微環(huán)境的一個重要調(diào)節(jié)性組分。由此提示磁場可能成為一種新的治療手段，通過作用于造血微環(huán)境從而對放射損傷的造血系統(tǒng)產(chǎn)生修復作用。
　　目的：研究旋轉磁場暴露對受60Coγ射線照射小鼠骨髓型急性放射病的治療作用，并探討其可能的機制。
　　方法：
　　1.94只雄性BALB

3、/c小鼠，隨機分為對照組和磁場治療組，各組再隨機分為4組，分別接受0Gy，6Gy，8Gy，10Gy60Coγ射線全身一次照射。小鼠接受不同劑量射線照射后，磁療組接受磁場處理30d，每天2次，每次l.5h，對照組不接受磁場處理，觀察小鼠30d生存期及生存率。
　　2.132只雄性BALB/c小鼠隨機分為正常組（N），單純磁療組（M），單純照射組（R）和照射磁療組（R+M）4組，正常組小鼠不作任何處理，單純照射組和照射磁療組小鼠接受一

4、次6Gy劑量的60Coγ射線全身照射，單純照射組和照射磁療組小鼠，接受磁場處理30d，每天2次，每次l.5h。各組小鼠進行以下檢測：
　?。?）測定第0，5，9，15，21，30d外周血細胞數(shù)。
　?。?）測定第9，23，30d骨髓有核細胞數(shù)（BMNC）、骨髓細胞細胞周期、細胞凋亡、脾集落形成單位（CFU-S）、脾臟指數(shù)（脾體比）。
　　（3）骨髓病理學檢測及骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP2/4）的表達水平檢測。
　　（

5、4）測定第9，23，30d血清超氧化物歧化酶活力（SOD）和丙二醛（MDA）含量。
　　（5）第9，23，30d肺羥脯氨酸含量測定及肺病理形態(tài)學的光鏡、電鏡觀察肺損傷情況。
　　結果：
　　1.磁場對不同輻射劑量損傷小鼠30d的生存率和生存期的影響
　　單純磁場處理對正常小鼠生存期及生存率無明顯影響；10Gy組和8Gy組小鼠生存率和生存期磁療組與對照組比較均無明顯差異（P>0.05）；6Gy組磁療組30d平均生存

6、率為71.43％，平均生存期為（24.93±8.43）d，對照組30d平均生存率21.41％，平均生存期為（17.07±7.70）d，磁療提高了小鼠的生存率和生存期（P<0.05）。提示磁場處理對急性放射性骨髓損傷小鼠具有一定的治療作用，該治療作用在較低受照劑量下尤為明顯，當受照劑量較高時，磁場的治療效果則不明顯。
　　2.磁場對6Gy60Coγ射線放射損傷小鼠造血功能相關指標的影響
　?。?）小鼠的外周血象
　　M組

7、與N組比較，外周血象無明顯差異。R+M組與R組比較：R+M組d15外周血白細胞數(shù)及血紅蛋白含量、d21血紅細胞數(shù)、d30血小板數(shù)高于R組（P<0.05），其余時間點外周血紅細胞、血紅蛋白、血小板、淋巴細胞兩組比較差異無顯著性（P>0.05）。
　?。?）小鼠的脾結節(jié)數(shù)、骨髓有核細胞數(shù)及骨髓細胞細胞周期及凋亡的檢測
　　d9R+M組CFU-S、BMNC數(shù)、細胞G2+M期比例高于R組（P<0.05），總凋亡率R+M組低于R組（P

8、<0.05）。d23脾臟指數(shù)R+M組明顯高于R組（11.268±4.269）vs（6.442±1.429）（P<0.05）。R+M、R組小鼠的脾臟指數(shù)d9均低于N組及M組，d23明顯高于N組及M組（P<0.05）。三個時間點M與N組在脾臟指數(shù)、骨髓有核細胞數(shù)方面無明顯差異；R+M組、R組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)明顯低于M組和N組（P<0.05）。
　　（3）骨髓切片HE染色及骨髓組織BMP2/4免疫組化檢查
　　R組小鼠骨髓d9

9、較空虛，骨髓細胞稀少，而R+M組小鼠骨髓細胞較充盈，隨著時間的推移，小鼠骨髓結構逐漸恢復正常。R+M組小鼠骨髓BMP2/4表達水平明顯高于R組，N組及M組骨髓結構正常，與R組和R+M組比較，BMP2/4低表達。
　　（4）血清自由基的測定
　　輻射使小鼠d9血清SOD活力明顯降低而MDA含量明顯增高，d23小鼠血清MDA含量依然增高（P<0.05），至d30接近正常水平。磁療后d9，R+M組SOD活力是（272.602±34

10、.058）U/ml，高于R組（229.611±42.433）（P<0.05），而MDA含量，R+M組是（24.875±7.246）nmol/ml，低于R組（32.396±6.855）nmol/ml（P<0.05）；R組與M組及N組比較，SOD活力降低而MDA含量增高（P<0.05）；R+M組的SOD活力和MDA含量與M組及N組比較，沒有明顯差異（P>0.05）。磁療后d23，R+M組的MDA含量低于R組，為（16.494±3.912）v

11、s（25.000±7.266）nmol/ml（P<0.05），兩者均高于M組及N組（P<0.05），而兩組SOD活力與M組及N組比較沒有明顯差異（P>0.05）。磁療后d30，4組間的SOD活力及MDA含量沒有明顯差異（P>0.05）。M組與N組比較，3個時間點的SOD活力及MDA含量均無明顯差異（P>0.05）。
　　（5）肺羥脯氨酸含量測定及光鏡、電鏡超微結構的觀察
　　N組和M組肺羥脯氨酸含量在3個時間點上都低于R組和

12、R+M組，有明顯差別（P均<0.05）。R組和R+M組肺羥脯氨酸含量在3個時間點均無明顯差別（P均>0.05）。蘇木精-伊紅染色結果顯示，N組肺組織結構正常；照射后d9，R組及R+M組肺泡壁輕度增厚，普遍肺毛細血管擴張、充血，少量淋巴細胞、中性白細胞浸潤。小鼠肺組織透射電鏡觀察結果顯示，照射后d30，N組及M組肺間質(zhì)膠原纖維正常無增生；R組及R+M組肺可見肺間質(zhì)膠原纖維較N組及M組明顯增多，但R+M組與R組比較差別不明顯。以上結果提示照