大劑量粒細(xì)胞集落刺激因子治療急性放射病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目前在急性放射病臨床救治工作中，細(xì)胞因子特別是造血細(xì)胞生長(zhǎng)因子的應(yīng)用使得重度以下骨髓型急性放射病病人得以長(zhǎng)期活存。在更大劑量照射條件下，盡管應(yīng)用了骨髓或外周血造血干細(xì)胞移植等先進(jìn)治療手段暫時(shí)恢復(fù)了病人的造血功能，但極重度骨髓型急性放射病人目前仍無(wú)一例長(zhǎng)期植入的。致死性射線損傷能否恢復(fù)以及恢復(fù)的程度主要取決于機(jī)體造血和免疫兩大系統(tǒng)的功能是否重建以及重建的程度，而造血細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)急性輻射損傷后造血功能的重建依賴于照射后患者體內(nèi)是否殘留有

2、造血干/祖細(xì)胞以及殘留造血干/祖細(xì)胞的質(zhì)量。若骨髓型急性放射病患者體內(nèi)仍殘留有一定數(shù)量且功能正常的造血干細(xì)胞，即可使用造血細(xì)胞生長(zhǎng)因子刺激其增殖分化，恢復(fù)病人自身造血功能，而不需要進(jìn)行造血干細(xì)胞移植，從而可避免因保證造血干細(xì)胞成功植入和/或防治移植物抗宿主病所用的大劑量免疫抑制劑而導(dǎo)致急性放射病患者消化、呼吸功能紊亂和皮膚損傷加重，甚至嚴(yán)重的真菌和/或病毒感染，進(jìn)而導(dǎo)致多臟器功能不全甚至衰竭(MOF)的風(fēng)險(xiǎn)。因此，對(duì)于有造血干細(xì)胞殘留的

3、重癥骨髓型急性放射病患者，使用造血細(xì)胞生長(zhǎng)因子治療可能比使用造血干細(xì)胞移植更為有利。為探討大劑量重組人粒細(xì)胞集落刺激因子治療重癥骨髓型急性放射病的可能性，我們對(duì)8.0Gy 60Co γ射線照射C57 BL/6小鼠及10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴進(jìn)行了基于造血細(xì)胞因子方案的實(shí)驗(yàn)治療研究，以期為重癥骨髓型急性放射病的臨床救治提供新的治療措施。
　　 本研究應(yīng)用大劑量rhG-CSF治療8.0Gy 60Co γ射線致死性照射所

4、致的急性放射病小鼠模型，觀察了經(jīng)治療后長(zhǎng)期存活小鼠造血和免疫系統(tǒng)各指標(biāo)的遠(yuǎn)后恢復(fù)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)增加rhG-CSF給藥劑量可以顯著提高致死劑量照射小鼠的存活率。照射后30d內(nèi)照射對(duì)照組小鼠全部死亡，死亡動(dòng)物平均活存天數(shù)為12.1±3.0d。而大劑量rhG-CSF(1000μg/kg)可以使8.0Gy 60Co γ射線照射小鼠30d存活率提高86.7％(vs0％)，300d時(shí)存活率80％。照射40d以后可以觀察到大劑量射線照射活存鼠毛色變灰

5、繼而全身灰白。外源性脾結(jié)節(jié)數(shù)、造血祖細(xì)胞培養(yǎng)、外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)臟器病理組織學(xué)觀察等結(jié)果表明，大劑量rhG-CSF治療組活存300d小鼠造血系統(tǒng)仍然沒(méi)有完全恢復(fù)到同批隨養(yǎng)的正常鼠水平；外周血淋巴細(xì)胞亞群和脾臟T/B細(xì)胞增殖能力及胸腺脾臟臟器系數(shù)等免疫指標(biāo)測(cè)定結(jié)果顯示仍存在不同程度的病變。但是大劑量rhG-CSF治療組小鼠造血以及免疫系統(tǒng)各指標(biāo)恢復(fù)程度均遠(yuǎn)好于小劑量rhG-CSF(250μg/kg)治療組。在照射小鼠實(shí)驗(yàn)治療基礎(chǔ)上，我們

6、觀察了大劑量rhG-CSF(200μg/kg)對(duì)10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴的治療作用。研究發(fā)現(xiàn)大劑量rhG-CSF可以使10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴活存，30d存活率可達(dá)60％，而照射對(duì)照組兩只動(dòng)物分別在照后12d和15d死于腸道或心臟出血。外周血象檢測(cè)結(jié)果顯示大劑量rhG-CSF可以顯著升高10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴外周血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞數(shù)，促進(jìn)治療猴外周血CFU-GM的生成，促進(jìn)

7、造血功能恢復(fù)。同時(shí)大劑量rhG-CSF高效的動(dòng)員作用，不僅可以為各系造血細(xì)胞的更新增殖提供種子，還為造血系統(tǒng)的全面恢復(fù)提供了可能性。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)大劑量rhG-CSF照射后0.5和24小時(shí)兩次給藥方案可明顯促進(jìn)10.0Gy照射恒河猴造血功能恢復(fù)，主要為升高外周血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和血小板數(shù)；大劑量rhG-CSF還可將照射動(dòng)物體內(nèi)殘留干/祖細(xì)胞動(dòng)員到外周血并再“歸巢”，經(jīng)過(guò)這樣的自體干細(xì)胞遷移過(guò)程有利于干細(xì)胞“自發(fā)