粒細(xì)胞集落刺激因子動(dòng)員干細(xì)胞治療急性心肌梗死研究.pdf

1、第一部分粒細(xì)胞集落刺激因子對梗死心臟的修復(fù)及心功能的改善 目的：觀察G-CSF對心肌梗死大鼠梗死區(qū)的修復(fù)和心功能的改善作用。 方法：29只大鼠隨機(jī)分為干細(xì)胞動(dòng)員組(GAMI，n=9)、心肌梗死對照組(AMI，n=10)和假手術(shù)組(SO，n=10)。GAMI組給予G-CSF50μg/kg/day，每日一次，皮下注射，共7天。AMI組及SO組則每日皮下注射同等體積的生理鹽水，共7天。心肌梗死后4周，通過心臟插管測量血流動(dòng)力學(xué)

2、參數(shù)，并在顯微鏡下觀察梗死范圍和梗死區(qū)、梗死周邊區(qū)小血管數(shù)量的變化。 結(jié)果：AMI組大鼠有三只分別于術(shù)后第3、7及第8天死亡，GAMI組與SO組大鼠至觀察結(jié)束無一只死亡。與SO組相比較，AMI組LVSP(p＜0.01)、dp/dtmax(p＜0.01)、dp/dtmin(p＜0.05)降低，LVEDP明顯升高(p＜0.01)；GAMI組dp/dtmax(p＜0.05)、LVEDP升高(p＜0.01)，LVSP、dp/dtmin無

3、明顯變化(p＞0.05)。與AMI組相比較，GAMI組LVSP(p＜0.01)、dp/dtmax(p＜0.01)、dp/dtmin(p＜0.05)升高，LVEDP降低(p＜0.05)。與AMI組相比較，GAMI組梗死范圍明顯縮小(p＜0.01)，梗死區(qū)及梗死周邊區(qū)小血管密度明顯增加(p＜0.05)。 結(jié)論：應(yīng)用G-CSF可縮小心肌梗死大鼠梗死范圍、提高梗死區(qū)及梗死周邊區(qū)小血管密度并改善心功能。 第二部分粒細(xì)胞集落刺激因子

4、對心肌梗死大鼠心肌T細(xì)胞亞群的影響 目的：探討G-CSF對心肌梗死大鼠心肌T淋巴細(xì)胞亞群的影響。方法：29只大鼠隨機(jī)分為干細(xì)胞動(dòng)員組(GAMI，n=9)、心肌梗死對照組(AMI，n=10)和假手術(shù)組(SO，n=10)。GAMI組給予G-CSF50μg/kg/day，皮下注射，共7天。AMI組及SO組則每日皮下注射同等體積的生理鹽水，共7天。心肌梗死后4周，通過免疫組化染色檢測心肌CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)并計(jì)算CD4+

5、/CD8+比率。結(jié)果：AMI組大鼠有三只分別于術(shù)后第3、7及第8天死亡，、GAMI組與SO組大鼠至觀察結(jié)束無一只死亡。與AMI組相比較，GAMI組CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)降低(p＜0.01，p＜0.01)，CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯變化(p＞0.05)，CD4+/CD8+比率上調(diào)(p＜0.01)。結(jié)論：G-CSF可降低心肌梗死后大鼠心肌CD3+和CD8+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、上調(diào)CD4+/CD8+比率，提示G-CSF可減輕心肌梗死后的

6、免疫損傷。 第三部分粒細(xì)胞集落刺激因子對心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響 目的：研究G-CSF對心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響及其與心功能改善的相關(guān)性。方法：29只大鼠隨機(jī)分為干細(xì)胞動(dòng)員組(GAMI，n=9)、心肌梗死對照組(AMI，n=10)和假手術(shù)組(SO，n=10)。GAMI組給予G-CSF50μg/kg/day，皮下注射，共7天。AMI組及SO組則每日皮下注射同等體積的生理鹽水，共7天。心肌梗死后4周，通過心臟插管

7、測量血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果：AMI組大鼠有三只分別于術(shù)后第3、7及第8天死亡，、GAMI組與SO組大鼠至觀察結(jié)束無一只死亡。與SO組相比較，AMI組凋亡指數(shù)明顯增高(p＜0.01)，GAMI組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。與AMI組相比較，GAMI組凋亡指數(shù)降低，在梗死周邊區(qū)、遠(yuǎn)離梗死區(qū)和整體觀分別為p＜0.01、p＜0.05和p＜0.01。左室舒張期末壓(LVEDP)與梗死周邊區(qū)凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)

8、之間呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.872，p＜0.01，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：G-CSF可減輕心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡，并可以通過減輕心肌細(xì)胞凋亡改善心臟功能。 第四部分G-CSF動(dòng)員CD34+細(xì)胞在大鼠梗死心臟歸巢及表達(dá)GATA-4 目的：應(yīng)用G-CSF對心肌梗死大鼠進(jìn)行干細(xì)胞動(dòng)員，研究心肌部位CD34+細(xì)胞GATA-4的表達(dá)，以期證實(shí)自體CD34+細(xì)胞可在心臟轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞。方法：28只大鼠隨機(jī)分為干細(xì)胞動(dòng)員組(GAM

9、I，n=9)、心肌梗死對照組(AMI，n=9)和假手術(shù)組(SO，n=10)。GAMI組給予G-CSF50μg/kg/day，皮下注射，共4天。AMI組及SO組則每日皮下注射同等體積的生理鹽水，共4天。心肌梗死后第5天處死動(dòng)物，用免疫熒光的方法檢測心肌CD34+細(xì)胞GATA-4的表達(dá)。結(jié)果：AMI組大鼠在術(shù)后第2天死亡一只，GAMI組和SO組大鼠至觀察終點(diǎn)無一死亡。GAMI組表達(dá)GATA-4的CD34+細(xì)胞的陽性率為44.4％，95％可信