分子超聲造影成像評估動脈粥樣硬化小鼠升主動脈炎性損傷的實驗研究.pdf

1、目的:血管黏附分子的高水平表達是動脈粥樣硬化病變炎癥損傷的重要環(huán)節(jié)。血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)作為重要的黏附分子之一，其表達上調(diào)不僅是血管內(nèi)皮損傷的早期分子標志，而且其表達水平能夠在一定程度上反映內(nèi)皮炎性損傷的程度。本研究利用攜 VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡，動態(tài)觀察這種靶向微氣泡對不同病變階段的動脈粥樣硬化病變特異分子表型的檢測能力，探討超聲造影成像中特異性分子信號強度與VCAM-1表達以及炎性損傷變化之間的關(guān)系。

2、>　　方法:62只高脂飲食喂養(yǎng)的雄性載脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠作為年齡依賴性動脈粥樣硬化病變模型，另54只普通飼料喂養(yǎng)的雄性C57BL/6J小鼠作為對照實驗動物。實驗動物分別于8、16、24、32周齡，采用超聲造影成像觀測小鼠近端升主動脈內(nèi)攜VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡的特異性顯影增強效果；熒光顯微鏡下離體觀察靶向微氣泡對主動脈動脈粥樣硬化病變的特異性粘附作用；獲取近端升主動脈組織進行H&E染色、Mac-2染色以及Weste

3、rn Blot分析，評估各周齡組小鼠動脈粥樣硬化病變進展程度、單核/巨噬細胞浸潤程度以及VCAM-1的表達水平。
　　結(jié)果:高脂飲食喂養(yǎng)的ApoE基因敲除小鼠，其動脈粥樣硬化病變呈年齡依賴性進展，8周齡時動脈內(nèi)膜可出現(xiàn)散在的脂肪紋，至32周齡即可見廣泛的動脈粥樣斑塊形成；超聲造影成像中，ApoE基因敲除小鼠近端升主動脈內(nèi)攜VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡的信號強度均顯著高于同齡對照組小鼠；ApoE基因敲除小鼠中，自8周齡至32周齡

4、組，近端升主動脈內(nèi)靶向微氣泡信號強度逐漸增強，依次為3.44±0.39dB、5.02±1.31dB、10.03±1.96dB、23.9±3.9dB，各組間具有統(tǒng)計學(xué)差異；ApoE基因敲除小鼠近端升主動脈VCAM-1的表達水平以及單核/巨噬細胞浸潤的范圍亦呈年齡依賴性的增加，表明炎癥損傷程度的進行性加重。對照組C57BL/6J小鼠中靶向微氣泡信號強度、升主動脈VCAM-1的表達水平以及單核/巨噬細胞浸潤范圍在各周齡組間均無顯著性差異。