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1、黃酮類(lèi)化合物在自然界的存在非常廣泛,大多數(shù)的植物中都存在有黃酮類(lèi)化合物,而且許多研究表明黃酮類(lèi)化合物具有多種生物活性。研究表明黃酮類(lèi)化合物屬于植物激素類(lèi)物質(zhì),具有激素樣作用。菟絲子是傳統(tǒng)的補(bǔ)腎壯陽(yáng)中藥,在中國(guó)用于治療多種激素缺乏引起的疾病。菟絲子具有滋補(bǔ)肝腎,固精縮尿,安胎,明目,止瀉等作用。可用于陽(yáng)痿遺精,尿有余瀝,以及尿頻,腰膝酸軟,目昏耳鳴,。腎虛胎漏,胎動(dòng)不安,脾腎虛瀉,外治白癜風(fēng)。 香豆素類(lèi)化合物是一類(lèi)具有芳甜香氣的天
2、然產(chǎn)物,是藥用植物的活性成分之一。香豆素類(lèi)化合物具有重要的生物活性,研究表明香豆素類(lèi)化合物具有激素樣作用。蛇床子亦為傳統(tǒng)的補(bǔ)腎壯陽(yáng)中藥,在中國(guó)的使用的歷史非常悠久。《中國(guó)藥典》記載蛇床子具有溫腎壯陽(yáng),燥濕,祛風(fēng),殺蟲(chóng)的作用??捎糜陉?yáng)痿,宮冷,寒濕帶下,濕痹腰痛,外治外陰濕疹,婦人陰癢,滴蟲(chóng)性陰道炎。 本實(shí)驗(yàn)研究菟絲子總黃酮和蛇床子總香豆素對(duì)腎陽(yáng)虛模型的治療恢復(fù)作用。采用乙醇回流提取和聚酰胺柱層析獲得菟絲子總黃酮;采用乙醇回流提取
3、和大孔吸附樹(shù)脂柱層析獲得蛇床子總香豆素。將小鼠隨機(jī)分為八個(gè)組,分別為正常對(duì)照組,模型對(duì)照組,甲基睪酮陽(yáng)性對(duì)照組,金匱腎氣丸陽(yáng)性對(duì)照組,菟絲子大劑量給藥組,菟絲子小劑給藥量,蛇床子大劑量給藥組,蛇床子小劑量給藥組(每組10只);除正常組外,其余各組腹腔注射氫化可的松制造。腎陽(yáng)虛模型;造模成功以后,分別給菟絲子大、小劑量組以等體積不同濃度的菟絲子總黃酮溶液灌胃,蛇床子大、小劑量組用等體積不同濃度的蛇床子總香豆素溶液灌胃,甲基睪酮組給以等體積
4、的甲基睪酮,金匱腎氣丸組給以等體積金匱腎氣丸溶液,正常組和模型組給以等體積的生理鹽水,灌胃14天后,摘除眼球取血,離心收集血清,并取其腎臟、性腺,免疫組織化學(xué)材料用固定液固定,其余材料液氮速凍備用。分別采用放射免疫法測(cè)定血清中睪酮含量,采用實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)錄水平mRNA的表達(dá),采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)組織中蛋白質(zhì)的分布與表達(dá)量。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: (1)菟絲子總黃酮的得率為2.6%,其中黃酮類(lèi)化合物含量為57.3%;
5、 (2)蛇床子香豆素的得率為4.3%,采用 HPLC 測(cè)得其中蛇床子素的含量為19.9%; (3)菟絲子總黃酮和蛇床子總香豆素能夠恢復(fù)氫化可的松引起的小鼠體重下降,改善小鼠的腎陽(yáng)虛狀態(tài); (4)菟絲子總黃酮和蛇床子總香豆素能夠使腎陽(yáng)虛小鼠降低的血清睪酮含量得到恢復(fù),使其接近正常組; (5)菟絲子總黃酮和蛇床子總香豆素能夠改善氫化可的松引起mRNA的表達(dá)量下降,使給藥組的mRNA表達(dá)量接近正常組; (
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