大鼠胸10節(jié)段脊髓損傷致膀胱順應(yīng)性改變及形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)建立大鼠胸10節(jié)段脊髓橫斷模型，誘導(dǎo)出神經(jīng)源性膀胱，觀察胸10節(jié)段脊髓橫斷致大鼠膀胱順應(yīng)性改變后膀胱重量、逼尿肌漏尿點(diǎn)壓、膀胱順應(yīng)性、膀胱壁組織結(jié)構(gòu)及ICC細(xì)胞分布、數(shù)量的變化。探討不同順應(yīng)性膀胱的病理生理改變，明確ICC細(xì)胞在神經(jīng)源性低順應(yīng)性膀胱發(fā)病中的作用，為進(jìn)一步豐富和完善神經(jīng)源性低順應(yīng)性膀胱發(fā)病機(jī)理及治療提供必要的理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，同時(shí)，為后續(xù)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)提供前期支持。
　　方法:
　　正常成年雌性

2、Wistar大鼠40只，體重在210-220g，隨機(jī)分為兩組:A組8只、B組32只。A組為假手術(shù)對(duì)照組，B組為胸10節(jié)段脊髓橫斷組。主要步驟為:稱(chēng)重、麻醉后，鼠板俯臥位固定，定位:根據(jù)浮肋連接的第13胸椎作為骨性標(biāo)志定位至胸10節(jié)段脊髓（對(duì)應(yīng)脊柱第8胸椎），確定損傷部位后背部備皮、消毒，取背部正中切口，依次切開(kāi)皮膚、皮下筋膜、向兩側(cè)鈍性分離豎脊肌，破壞椎體，直至暴露脊髓，用眼科手術(shù)刀將脊髓快速切斷（可見(jiàn)大鼠后肢痙攣性抽搐數(shù)次后軟癱，用顯

3、微剪剪除一段約1mm長(zhǎng)脊髓，保證脊髓完全橫斷）。對(duì)照組只暴露脊髓，不切斷，逐層縫合切口。各組均于手術(shù)后6周行尿動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，檢測(cè)完成后處死大鼠并留取膀胱標(biāo)本，行膀胱稱(chēng)重。常規(guī)HE染色觀察膀胱壁平滑肌、纖維結(jié)締組織變化;VG染色及Vaehoeff染色，光鏡下觀察膀胱中肌層厚度、膠原纖維及彈力纖維量的變化;應(yīng)用免疫熒光技術(shù)觀察ICC細(xì)胞在膀胱壁的分布及數(shù)量，每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)選取5個(gè)視野，得到的數(shù)碼照片用Image pro圖像處理軟件分析，計(jì)算每個(gè)

4、視野ICC細(xì)胞數(shù)量，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1.成功制作了大鼠胸10節(jié)段脊髓橫斷動(dòng)物模型并順利地進(jìn)行了大鼠膀胱尿流動(dòng)力學(xué)測(cè)定。
　　2.膀胱順應(yīng)性:至行尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)時(shí)，32只實(shí)驗(yàn)組大鼠，死亡10只，尿流動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示，存活的22只大鼠中，神經(jīng)源性高順應(yīng)性膀胱大鼠12只，神經(jīng)源性低順應(yīng)性膀胱大鼠6只，正常順應(yīng)性膀胱大鼠4只。神經(jīng)源性高順應(yīng)組膀胱順應(yīng)性與假手術(shù)對(duì)照組相比明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);神經(jīng)

5、源性低順應(yīng)組膀胱順應(yīng)性與假手術(shù)對(duì)照組相比明顯降低，有顯著差異(P＜0.01)。
　　3.形態(tài)學(xué)研究顯示:
　　胸10節(jié)段脊髓橫斷6周后膀胱結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生了明顯改變，膀胱重量明顯增加，實(shí)驗(yàn)組膀胱重量明顯比對(duì)照組重，有顯著差異(P＜0.01);膀胱/體重比實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組，有顯著差異(P＜0.01)。
　　光鏡觀察到胸10節(jié)段脊髓橫斷6周后逼尿肌出現(xiàn)不同程度的肌萎縮，肌束間膠原纖維浸潤(rùn)顯著增多;低順應(yīng)組纖維結(jié)締組織的百

6、分含量明顯大于對(duì)照組及高順應(yīng)組，有顯著差異(P＜0.01);高順應(yīng)組纖維結(jié)締組織百分含量大于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。熒光顯微鏡觀察顯示不同組間ICC細(xì)胞有所變化，高順應(yīng)組平均每視野下ICC數(shù)量較正常組明顯減少(P＜0.01)，差異顯著;低順應(yīng)組平均每個(gè)視野下ICC數(shù)量較正常組明顯增加(P＜0.01)，差異顯著。
　　結(jié)論:
　　1胸10節(jié)段脊髓損傷對(duì)膀胱功能的影響在膀胱順應(yīng)性上可表現(xiàn)為高順應(yīng)性及低順應(yīng)性兩類(lèi)，具

7、體類(lèi)型應(yīng)根據(jù)尿流動(dòng)力學(xué)結(jié)果劃分。
　　2神經(jīng)源性膀胱尿流動(dòng)力學(xué)表現(xiàn)為:低順應(yīng)組膀胱最大容量降低、逼尿肌漏尿點(diǎn)壓力增高、膀胱順應(yīng)性降低;高順應(yīng)組膀胱最大容量增大、逼尿肌漏尿點(diǎn)壓力降低、膀胱順應(yīng)性升高。
　　3胸10節(jié)段脊髓損傷后，膀胱壁組織發(fā)生重塑，逼尿肌出現(xiàn)不同程度的肌萎縮，肌束間膠原纖維浸潤(rùn)，纖維結(jié)締組織含量發(fā)生變化，影響膀胱順應(yīng)性。
　　4胸10節(jié)段脊髓損傷后，不同順應(yīng)性組別間ICC數(shù)量發(fā)生變化，可能與膀胱順應(yīng)性發(fā)