大鼠周圍神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合與端端縫合后神經(jīng)纖維生長速度上比較.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷(Peripheral nerve injury，PNI)是周圍神經(jīng)因某些因素引起損傷及缺血造成神經(jīng)傳導(dǎo)功能障礙、神經(jīng)軸索中斷或神經(jīng)斷裂而導(dǎo)致軀干或四肢感覺、運(yùn)動及交感神經(jīng)功能障礙的一種臨床病癥。周圍神經(jīng)最常見的損傷原因?yàn)闄C(jī)械性因素所造成，如切割傷、牽拉傷、壓迫傷等。在臨床實(shí)踐中，很多周圍神經(jīng)損傷，不是單一原因所致，而是多種因素綜合作用的結(jié)果。按損傷的程度不同，1943年seddon將其分為三類：神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯，軸突中斷及神經(jīng)

2、斷裂。1951年Sunderland將神經(jīng)損傷分為1～5度，近年Mackinnon和dellon又提出第6度損傷，即在神經(jīng)內(nèi)的不同束間存在著不同程度的各種混合損傷。
　　 目前周圍神經(jīng)損傷后修復(fù)治療主要是針對神經(jīng)修復(fù)過程中的各個環(huán)節(jié)進(jìn)行，包括縫合方法、組織工程、生物分子治療、藥物治療及康復(fù)治療等。但由于周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生速度緩慢，再生軸突常需要相當(dāng)長的時間才能到達(dá)周圍靶器官。在靶器官重新獲得神經(jīng)再支配前，失神經(jīng)支配肌肉將發(fā)生

3、營養(yǎng)性及失用性萎縮，并隨著結(jié)締組織的增生、失神經(jīng)時間的延長而逐漸加重，最終導(dǎo)致不可逆的肌肉萎縮。特別是對高位周圍神經(jīng)損傷，由于距靶器官較遠(yuǎn)，應(yīng)用傳統(tǒng)的神經(jīng)直接縫合、橋接或者異體神經(jīng)移植等方法后，神經(jīng)需要漫長的再生過程才能到達(dá)靶器官，而此時所支配的肌肉及運(yùn)動終板由于長時間的失神經(jīng)營養(yǎng)而發(fā)生變性、萎縮，使其療效明顯變差甚至無效。因此，周圍神經(jīng)損傷后，如何保護(hù)靶器官、延緩肌萎縮和終板變性、促進(jìn)神經(jīng)再生、改善再生神經(jīng)功能，降低肢體功能障礙程度，

4、一直是神經(jīng)修復(fù)和再生的基礎(chǔ)和臨床研究熱點(diǎn)。長期以來科研工作者和臨床醫(yī)生做出大量工作，但療效肯定且應(yīng)用廣泛的仍是端端縫合法，并已從外膜縫合、束膜縫合、束組縫合發(fā)展到外膜束膜縫合術(shù)。目前國際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的神經(jīng)端端縫合法近端再生神經(jīng)纖維通過縫合口的時間為2-3周，并以每天1-2mm/d的速度向遠(yuǎn)端生長，而神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合未有相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)的目的是比較神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合和端端縫合新生神經(jīng)纖維生長速度，為神經(jīng)再生提供理論依據(jù)。
　　 研究目的：

5、r>　　 設(shè)計(jì)側(cè)側(cè)縫合和端端縫合方法的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停ㄟ^組織學(xué)切片來研究神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合和端端縫合方法神經(jīng)纖維生長速度。對觀察結(jié)果進(jìn)行對比分析，探討觀察指標(biāo)的可靠程度，并提出更為科學(xué)的觀察指標(biāo)。為周圍神經(jīng)損傷后如何保護(hù)靶器官、延緩肌萎縮和終板變性，加快神經(jīng)生長速度提供依據(jù)。
　　 主要方法：
　　 1.動物分組及模型制作
　　 取雄性SD大鼠72只，8周齡，隨機(jī)數(shù)字表法分為A、B、C三組，體重200g-250g，左

6、下肢為實(shí)驗(yàn)側(cè)，右下肢為對照側(cè)，每組24只。大鼠稱重、麻醉，顯露雙下肢坐骨神經(jīng)，銳性切斷腓總神經(jīng)。對照組：用11-0無創(chuàng)尼龍針線將腓總神經(jīng)兩斷端行神經(jīng)行端端縫合；實(shí)驗(yàn)組：先切開腓神經(jīng)與脛神經(jīng)相鄰面的長0.5cm的神經(jīng)外膜和神經(jīng)束膜，使部分神經(jīng)纖維外露，再將兩神經(jīng)側(cè)方緊密對合.最后用11-0無創(chuàng)尼龍線縫合切開的束膜和外膜。兩組切斷的腓總神經(jīng)的近側(cè)斷端反轉(zhuǎn)180°，與附近的肌肉縫合。術(shù)后大鼠常規(guī)飼養(yǎng)。
　　 2.術(shù)后2周、3周、4周一

7、般情況和神經(jīng)縫合口大體觀察
　　 術(shù)后觀察大鼠足皮膚營養(yǎng)狀況和運(yùn)動功能。神經(jīng)縫合口術(shù)后4周取材大體觀察和組織學(xué)檢查。
　　 3.術(shù)后2周、3周、4周組織學(xué)切片計(jì)算神經(jīng)纖維通過縫合口的有效率
　　 術(shù)后2周、3周分別處死A組和B組SD大鼠，組織學(xué)切片的制作：甲醛固定后的標(biāo)本，乙醇梯度脫水，石蠟包埋，縫合口遠(yuǎn)側(cè)實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)各22和23個標(biāo)本制成4μm厚橫切面石蠟切片，蘇木素-伊紅染色(HE染色)后中性樹脂封片，計(jì)算

8、兩種縫合方法的通過率。同理術(shù)后4周處死C組SD大鼠，分別距神經(jīng)縫合口遠(yuǎn)端1.5 cm、2.0 cm、2.5 cm做神經(jīng)纖維組組織學(xué)切片及HE染色，計(jì)算兩種縫合方法的通過率。通過SPSS13.0軟件進(jìn)行完全隨機(jī)化X檢驗(yàn)組間比較。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1.術(shù)后早期所有大鼠足下肢出現(xiàn)足不能跖屈，大部分大鼠出現(xiàn)足底潰瘍，趾甲暗淡甚至所有大鼠脛前肌出現(xiàn)緩慢的萎縮，不同程度的行走困難和跛行。術(shù)后2周和3周，上述情況開始好轉(zhuǎn)；術(shù)后

9、4周，下肢皮膚營養(yǎng)障礙不同程度消失，少部分恢復(fù)足部背伸活動。神經(jīng)縫合口大體觀察術(shù)后4周取材，兩組神經(jīng)縫合口的神經(jīng)外膜均已經(jīng)融合，脛神經(jīng)外膜上的微小血管網(wǎng)沿增生的神經(jīng)外膜長入到遠(yuǎn)側(cè)的腓總神經(jīng)，脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合處以遠(yuǎn)神經(jīng)外膜血運(yùn)良好，神經(jīng)光滑，彈性好，局部可見神經(jīng)瘤及瘢痕形成。兩組脛神經(jīng)遠(yuǎn)近端無明顯變性表現(xiàn)。
　　 2.術(shù)后2周A組實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)新生神經(jīng)纖維通過縫合口的有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著差異(P＞0.05)；術(shù)后3周B組實(shí)驗(yàn)

10、側(cè)和對照側(cè)新生神經(jīng)纖維通過縫合口的有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著差異(P＞0.05)；術(shù)后4周C組實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)距神經(jīng)縫合口遠(yuǎn)端1.5 cm、2.0 cm、2.5 cm新生神經(jīng)纖維通過縫合口的有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.側(cè)側(cè)縫合再生的軸突可通過縫合口向靶肌肉生長，通過縫合口的時間和端端縫合無顯著差異，大約為2周。
　　 2.神經(jīng)側(cè)側(cè)縫合和端端縫合神經(jīng)纖維生長速度上在SD大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜕蠠o顯