生姜化學(xué)成分和水飛薊賓衍生物的分析與活性評(píng)價(jià).pdf

1、天然產(chǎn)物研究已經(jīng)成為發(fā)現(xiàn)創(chuàng)新藥物的重要來(lái)源之一。本文在本實(shí)驗(yàn)室前期工作基礎(chǔ)上，對(duì)我國(guó)云南省羅平產(chǎn)生姜的化學(xué)成分進(jìn)行了進(jìn)一步研究，并對(duì)13種生姜化學(xué)成分的抗氧化和細(xì)胞毒性等進(jìn)行了評(píng)價(jià)；另外，對(duì)16種2，3-脫氫水飛薊賓系列結(jié)構(gòu)修飾物的抗氧化活性等進(jìn)行了研究。
　　 一、生姜中化學(xué)成分的鑒定和生物活性評(píng)價(jià)
　　 生姜為姜科植物Zingiber officinale Roscoe的根莖，在全世界作為藥用的歷史悠久，其在我國(guó)中藥

2、處方中也經(jīng)常在列。生姜主要用于治療關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕病、嘔吐、十二指腸和胃潰瘍、扭傷、肌肉痛、疼痛、喉嚨痛、便秘、消化不良、高血壓、老年癡呆、發(fā)熱、感染性疾病和蠕蟲(chóng)病等。生姜的植物化學(xué)研究已經(jīng)鑒定出許多具有生物活性的化合物，如姜辣素、姜二酮類、姜烯酚和二苯基庚烷類等；其中二苯基庚烷類化學(xué)成分具有抑制前列腺素和白三烯合成生物的活性，以及抗真菌、抗氧化和預(yù)防癌癥等生物活性。
　　 通過(guò)對(duì)云南省羅平產(chǎn)生姜的深入植物化學(xué)研究，采用色譜技術(shù)分離

3、和純化了14個(gè)化合物；應(yīng)用核磁共振波譜(1H NMR，13C NMR和DEPT)、質(zhì)譜(EI-MS，ESI-MS＆HR-ESI-MS)、紅外光譜、元素分析、旋光測(cè)定等技術(shù)，鑒定了所獲得化合物的結(jié)構(gòu)，其中發(fā)現(xiàn)3個(gè)二苯基庚烷類和1個(gè)單萜類新化合物，分別為5-[4-羥基-6-(4-羥基苯乙基)四氫-2H-吡喃-2]-3-甲氧苯基-1，2-二醇(5-[4-hydroxy-6-(4-hydroxyphenethyl)tetrahydro-2H-p

4、yran-2-yl]-3-methoxybenzene-1，2-diol)、一對(duì)對(duì)映體：(E)-7-羥基-1，7-雙(4-羥基苯基)庚烷-5-烯3S磺酸鈉(Sodium(E)-7-hydroxy-1，7-bis(4-hydroxyphenyl)hept-5-ene-3S-sulfonate)和(E)-7-羥基-1，7-雙(4-羥基苯基)庚烷-5-烯-3R-磺酸鈉(sodium(E)-7-hydroxy-1，7-bis(4-hydroxy

5、phenyl)hept-5-ene-3R-sulfonate)、羥基桉-10-0-β-D葡萄糖苷(Hydroxycineole-10-0-β-D-glucopyranoside)。
　　 應(yīng)用清除超氧陰離子自由基和抑制肝微粒體中過(guò)氧化脂質(zhì)的形成之體外模型，對(duì)我們實(shí)驗(yàn)室分離獲得的化合物的抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。為了考察這些化合物在更接近生理?xiàng)l件下的抗氧化特性，應(yīng)用大鼠的肝臟分離原代培養(yǎng)細(xì)胞模型，進(jìn)一步檢測(cè)了化合物抑制叔丁基過(guò)氧化氫引

6、起氧化損傷的活性。為了評(píng)價(jià)化合物的抗腫瘤活性，在9種體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株上，測(cè)定了它們的細(xì)胞毒性。這9種腫瘤細(xì)胞株包括KB細(xì)胞，BEL7404細(xì)胞，P388Dl細(xì)胞，K562細(xì)胞，HL-60細(xì)胞，A549細(xì)胞，Hela細(xì)胞，CNE細(xì)胞，及PC-3細(xì)胞。在供試驗(yàn)的化合物中，大部分化合物對(duì)吩嗪甲基硫酸鹽-NADH系統(tǒng)顯示出強(qiáng)效的超氧陰離子自由基的清除能力。在更接近生物體條件的系統(tǒng)，這些化合物在鼠肝微粒體暴露于氧化條件之試驗(yàn)中，顯示出對(duì)肝臟脂質(zhì)

7、過(guò)氧化，具有強(qiáng)的保護(hù)作用。另外，我們還發(fā)現(xiàn)這些化合物對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞接觸氧化損傷具有細(xì)胞保護(hù)活性。二苯基庚烷類化學(xué)成分在上述所有實(shí)驗(yàn)中，顯示出有效的抗氧化生物活性。另一方面，實(shí)驗(yàn)也表明：這些化合物多數(shù)對(duì)腫瘤細(xì)胞不具備明顯的細(xì)胞毒性。
　　 二、脫氫水飛薊賓衍生物的抗氧化生物活性研究
　　 2，3-脫氫水飛薊賓(2，3-Dehydrosilybin，DHS)，一種天然水飛薊賓的衍生物，存在于水飛薊中的濃度相當(dāng)?shù)?。不象?/p>

8、飛薊賓，DHS的生物學(xué)研究非常有限，部分原因是其產(chǎn)率低和水溶性差(即低于水飛薊賓)。然而，最近的研究報(bào)告表明，DHS具有非常強(qiáng)的抗氧化活性，其活性高于水飛薊賓。因此，我們實(shí)驗(yàn)室對(duì)DHS進(jìn)行了一系列結(jié)構(gòu)修飾，本文對(duì)所有合成的16個(gè)DHS衍生物，以及水飛薊賓和DHS的藥理學(xué)活性進(jìn)行了研究，包括2，2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)、O2-氧自由基清除試驗(yàn)和抗脂質(zhì)過(guò)氧化抑制試驗(yàn)、對(duì)抗過(guò)氧化氫誘導(dǎo)PC12細(xì)胞毒性的神經(jīng)保護(hù)試驗(yàn)，以期獲得更全面的

9、有關(guān)DHS衍生物在體外對(duì)抗氧化損傷所造成的神經(jīng)元損傷的有效性數(shù)據(jù)。我們還采用亞鐵離子(Fc2+)螯合模型評(píng)價(jià)DHS類似物的生物學(xué)性質(zhì)，以確定不同模型DHS類似物在AD和PD治療中的抗氧化活性。研究結(jié)果表明，極性強(qiáng)的化合物，如C7-OH和C20-OH雙醚以及C7-OH單醚具有脂肪族取代的乙酰胺，具有非常好的抑制脂質(zhì)過(guò)氧化活性和Fe2+離子的螯合效價(jià).相反，C7- OH和C20-OH雙.烯丙基醚對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)損傷PC12細(xì)胞的保護(hù)作用比槲皮