中藥牡丹皮質(zhì)量控制及其有效成分的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、本課題建立了牡丹皮中的三種主要有效成分沒食子酸、芍藥苷和丹皮酚的HPLC-DAD含量測(cè)定方法，系統(tǒng)考察了影響提取效率的提取溶劑、提取時(shí)間、提取次數(shù)等因素，最后確定超聲提取20min，線性范圍分別為4.004～100.1μg/ml；20.6～515.0μg/ml；33.28～832.0μg/ml。平均回收率分別為100.7％、99.2％、97.8％；RSD分別為1.6％、3.0％、1.1％，方法準(zhǔn)確可靠，并應(yīng)用到16批牡丹皮藥材的測(cè)定，同

2、時(shí)建立了牡丹皮藥材的指紋圖譜，共匹配出17個(gè)共有峰，并對(duì)藥材進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，了解藥材間的質(zhì)量差異，結(jié)果顯示藥材質(zhì)量差異不明顯，多成分含量測(cè)定與指紋圖譜相結(jié)合的方法使得牡丹皮的質(zhì)量控制更全面、可靠。隨后我們采用主成分分析和聚類分析對(duì)藥材進(jìn)行了更細(xì)致的研究，在分析過程中，主成分分析和聚類分析可以相互印證，增加結(jié)果的可信度，結(jié)果顯示牡丹皮在主成分和聚類分析中都明顯被聚為四類，其中山東和河北產(chǎn)牡丹皮聚成一類，而安徽產(chǎn)牡丹皮則和浙江聚成一類，顯示

3、出一定的地域相關(guān)性，為牡丹皮質(zhì)量一致性和道地性研究提供依據(jù)。 采用HPLC-TOF/MS和GC-MS對(duì)牡丹皮藥材中的成分進(jìn)行定性鑒別。通過比對(duì)數(shù)據(jù)庫，在HPLC-TOF/MS研究中共鑒別出21中化合物，實(shí)驗(yàn)中分別采集了牡丹皮提取物的正、負(fù)離子流圖，并對(duì)其中的兩對(duì)同分異構(gòu)體進(jìn)行了鑒別。在此基礎(chǔ)上對(duì)指紋圖譜中色譜峰進(jìn)行指認(rèn)，指認(rèn)出17個(gè)共有峰中的14個(gè)，對(duì)牡丹皮指紋圖譜進(jìn)行明晰化，為更好的評(píng)價(jià)指紋圖圖譜的代表性以及闡明牡丹皮質(zhì)量差異

4、的來源提供了手段。指紋圖譜中14個(gè)共有峰絕大部分為牡丹皮中特有的芍藥苷和芍藥醇類物質(zhì)，表明具有較強(qiáng)的代表性。對(duì)牡丹皮中揮發(fā)油成分和乙醚提取物成分采用GC-MS進(jìn)行分析鑒別與定性研究，由于GC-MS聯(lián)用儀配有EI離子源，EI離子源所得質(zhì)譜圖具有重現(xiàn)性高，有相應(yīng)的化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫等特點(diǎn)，可借助計(jì)算機(jī)檢索與質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫自動(dòng)匹配進(jìn)行鑒別分析，實(shí)驗(yàn)中共成功鑒別出牡丹皮中32個(gè)成分，更全面的了解牡丹皮中的化學(xué)成分，為其后續(xù)質(zhì)量控制提供基礎(chǔ)。 建

5、立HPIC-MS方法測(cè)定大鼠血漿中芍藥苷含量，芍藥苷在0.0412μg/ml～10.30μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，芍藥苷低、中、高三個(gè)濃度的相對(duì)回收率均在95.0％～105％之間，日內(nèi)和日間精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差均小于6.0％；穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，芍藥苷在4℃貯存4天內(nèi)穩(wěn)定，常溫12h穩(wěn)定性良好。在給定的方法下，血漿中芍藥苷的定量限為0.0412μg/ml，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)均不干擾樣品峰，含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便可靠，適合于生物樣品成分的

6、含量測(cè)定。該方法成功應(yīng)用于SD大鼠口服給藥芍藥苷純品，牡丹皮提取物和復(fù)方(牡丹皮和丹參)提取物后的藥代動(dòng)力學(xué)研究。結(jié)果顯示口服芍藥苷純品和藥材提取物后芍藥苷在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)行為存在顯著差異，包括AUC0-t，AUC0-8，MRT，T1/2在內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)在口服藥材提取物之后顯著提高，表明生物利用度的提高，從藥代動(dòng)力學(xué)的角度闡明了中藥的優(yōu)越性以及中藥作用的整體性，中藥質(zhì)量控制必須從整體出發(fā)。從藥動(dòng)學(xué)結(jié)果推測(cè)芍藥苷生物利用度的提供可能與牡