利可君原料藥質(zhì)量控制及藥代動力學研究.pdf

1、一、研發(fā)背景
　　 利可君是一種典型的噻唑羧酸類抗癌升白藥物，對白細胞有促進增生作用，可廣泛用于各種原因引起的白細胞減少癥、血小板減少癥、再生障礙性貧血等，特別是癌瘤的放射治療和化學治療引起的白細胞減少癥。臨床用于血小板減少及再生障礙性貧血也具有一定療效，無明顯不良反應(yīng)，受到廣大患者和醫(yī)務(wù)人員的歡迎。利可君作為化藥在俄羅斯首次上市，而在韓國、巴西、印尼等國上市的利可君屬于重組蛋白類。國內(nèi)自1963年首次上市以來，該藥物發(fā)展迅速，

2、至今已有許多廠家仿制。南京長澳醫(yī)藥科技有限公司成功研制出具有自主知識產(chǎn)權(quán)的六類化藥利可君，本文根據(jù)《化學藥仿制藥研究技術(shù)指導原則》，對利可君原料藥質(zhì)量控制及藥代動力學進行了初步研究，為臨床研究提供參考依據(jù)。
　　 二、原料藥的質(zhì)量控制研究
　　 建立利可君的HPLC、GC檢測方法。HPLC法:采用DiamonsilC18(4.6mm×250mm，5μm);流動相:2mmol/L磷酸二氫鉀（含0.15％醋酸）—乙腈(62:

3、38)，流速:1.0mL·min-1;柱溫:30℃;檢測波長210nm。結(jié)果:主峰與相鄰雜質(zhì)峰分離度良好，利可君在0.01～0.5mg·mL-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9995，最低檢測限為0.5μg·mL-1。結(jié)論:該法簡便、準確，靈敏度高，專屬性強，可以用于利可君的有關(guān)物質(zhì)測定。
　　 GC有機溶劑檢查:用安捷倫DB-624(30m×0.32mm×1.8μm)毛細管柱，采用程序升溫40℃(維持10m

4、in)，再以50℃·min-1的速率升到180℃(維持5min);進樣口溫度150℃;氫火焰離子化檢測器(FID)溫度200℃;流速1.0mL·min-1;載氣為高純氮氣;分流比30∶1。外標法計算殘留溶劑的含量。結(jié)果:各溶劑峰均能達基線分離。結(jié)論:該法簡便、準確，靈敏度高，專屬性強。
　　 三、藥物代謝動力學研究
　　 建立測定大鼠血漿中利可君濃度的LC-MS方法。方法:取SD大鼠48只隨機分組，分別單劑量靜注（1mg

5、·kg-1）和灌胃(5、10、20mg·kg-1)的利可君，按不同時間點采血，血漿樣品經(jīng)高氯酸沉淀后進行LC-MS測定。色譜條件:色譜柱為AgilentZorbaxEclipseplusC18(150mm×3.9mmID，5μm)，流動相為乙腈-水-冰醋酸(20∶80∶0.3)，質(zhì)譜條件:電噴霧離子化(ESI)方式，選擇性正離子方式檢測，利可君和內(nèi)標替硝唑的選擇檢測離子質(zhì)荷比分別為m/z=296.1([M+H]+)和m/z=248.1(