丹參-川芎藥對(duì)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的：證明常用藥對(duì)---丹參-川芎的配伍應(yīng)用能提高臨床療效，提供中醫(yī)臨床用藥配伍的現(xiàn)代藥學(xué)的理論依據(jù)。
　　方法：1.運(yùn)用正交試驗(yàn)與樹(shù)脂吸附法優(yōu)化阿魏酸和丹酚酸B的提取與純化工藝?？疾炝税ㄈ軇┝?、提取時(shí)間、次數(shù)、乙醇濃度等在內(nèi)的影響提取率的因素；從靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)吸附兩個(gè)角度，考查包括樹(shù)脂類(lèi)型、除雜溶劑、洗脫溶劑、樹(shù)脂徑高比等在內(nèi)的能影響純化工藝的因素。2.使用 Agilent TC-C18 BDS(250×4.6 mm,5μm)

2、色譜柱，流動(dòng)相乙腈和0.5％乙酸水溶液，梯度洗脫，流速為1.0 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)為321 nm；柱溫為35℃的高效液相色譜分析方法，以阿魏酸和丹酚酸B為考察指標(biāo)，測(cè)定丹參-川芎藥對(duì)不同配比（2:1、4:3、1:1、2:3、1:2）情況下，有效成分的煎出率。3.大鼠隨機(jī)分成5組，分別尾靜脈注射給藥阿魏酸純品、阿魏酸純品+丹參多酚酸、川芎純化物、川芎純化物+丹參多酚酸、丹參多酚酸，不同時(shí)間點(diǎn)從眼眶靜脈叢取血，血漿樣品采用液-液萃取

3、法，UPLC檢測(cè)大鼠血漿中阿魏酸和丹酚酸B的濃度，使用WinNonlin6.2求算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。4.大鼠隨機(jī)分成3組，分別尾靜脈注射給藥川芎純化物、川芎純化物+丹參多酚酸、丹參多酚酸，不同時(shí)間解剖，取腹主動(dòng)脈血、心、肝、脾、肺、腎、腦、肌肉，血漿樣品采用液-液萃取法，組織樣品先蛋白沉淀再液-液萃取，UPLC-MRM檢測(cè)大鼠生物樣品中阿魏酸、丹酚酸B、紫草酸和迷迭香酸的濃度，制作藥時(shí)曲線及組織分布條形圖。
　　結(jié)果：1.確定川芎有

4、效成分阿魏酸的提取工藝為8倍量的70%乙醇提取3次，每次0.5 h；純化工藝為HPD300大孔吸附樹(shù)脂、上樣量為5：1（川芎：樹(shù)脂）、2BV水除雜、2BV50%乙醇洗脫。收集50%乙醇洗脫液，濃縮，運(yùn)用真空干燥，純化物中阿魏酸的含量為9.71%。確定丹酚酸B的水提工藝為8倍量溶劑，80℃溫浸兩次，每次0.5小時(shí)；純化工藝為HPD300大孔吸附樹(shù)脂、上樣量為1：2(丹參：樹(shù)脂)、2BV水除雜、3BV的40%乙醇洗脫。收集40%乙醇洗脫液，

5、濃縮，噴霧干燥，純化物中丹酚酸B的含量為73.6%。2.不同比例配比的丹參-川芎藥對(duì)中阿魏酸的煎出率均明顯高于川芎?jiǎn)渭鍟r(shí)阿魏酸的煎出率，高達(dá)39.98%至60.73%，其中以1:1配比的煎出率最高。丹酚酸B的煎出率隨著丹參在川芎中所占比例增大，先升后降，順序?yàn)?:2＜3:4＜1:0＜2:1＜3:2＜1:1。3全面考查了包含線性方程，精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和提取回收率在內(nèi)的方法學(xué)內(nèi)容，結(jié)果顯示所建立的血漿樣品處理方法和UPLC分析方法穩(wěn)定

6、可靠。經(jīng)WinNonlin6.2及SPSS軟件分析表明聯(lián)合給藥與單獨(dú)給藥的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)譬如半衰期(T1/2)、曲線下面積(AUC)等均有顯著性差異。4.綜合考核了包含線性方程，精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和提取回收率在內(nèi)的方法學(xué)內(nèi)容，結(jié)果顯示所建立的血漿樣品處理方法、組織樣品處理方法和UPLC-MRM分析方法穩(wěn)定可靠。從總體上來(lái)看，臟器組織中各藥物的含量均低于血漿中的，丹酚酸 B在大鼠組織中的濃度從高到低依次為：腎、肺、心、肝、肌肉，脾