LINGO基因家族與原發(fā)性震顫的相關(guān)性研究.pdf

1、論文1 Nogo受體作用蛋白1基因在湖南省漢族原發(fā)性震顫患者中的變異監(jiān)測
　　目的: 系統(tǒng)性分析湖南省漢族原發(fā)性震顫(essential tremor, ET)患者LINGO1基因(the leucine-rich repeat and1g domain containing nogoreceptor-interacting protein1 gene)全部編碼區(qū)的基因變異，分析這些基因變異在湖南省漢族人群中的基因型和等位基因的變

2、異頻率，探討LINGO1基因是否與湖南省漢族ET發(fā)病相關(guān)。
　　方法: 運用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)方法(polymerase chainreaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)對100例ET患者進(jìn)行LINGO1基因全部編碼區(qū)的遺傳學(xué)分析，用直接測序法確定變異基因型。在151例ET患者（包括最初檢測的100例患者）和301例性別、年齡和種族相匹配的正常

3、對照者中對檢測到的基因變異進(jìn)一步分析基因型和等位基因分布的頻率差異。
　　結(jié)果: 1.對100例ET患者采用PCR-SSCP和直接測序突變檢測后，我們發(fā)現(xiàn)了4個LINGO1基因變異(rs2271398，rs2271397，1個新的G＞C堿基替換ss491228439和rs3743481)，4個變異均為同義突變，預(yù)測既不改變氨基酸也不改變剪切位點。2.在151例ET患者和301例性別、年齡和種族相匹配的正常對照者中進(jìn)行全部4個基因變

4、異(rs2271398，rs2271397，ss491228439和rs3743481)基因型頻率和等位基因頻率的分析，并沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(All P＞0.05)。但在隨后的性別分層分析中發(fā)現(xiàn)rs2271397和ss491228439的C等位基因是女性ET患者發(fā)病的危險因素(rs2271397:P=0.017，OR=2.139，95％ CI1.135～4.030;ss491228439:P=0.038,OR=1.812,95％ CI1

5、.027～3.194)，且單體型分析也發(fā)現(xiàn)A465-C474-C714單體型與女性ET患者發(fā)病相關(guān)(P=0.041，OR=1.800，95％ CI1.020～3.178)，其野生型G465-T474-G714單體型對患者發(fā)病起保護(hù)作用(P=0.023，OR=0.484,95％CI0.256～0.915)。
　　結(jié)論: LINGO1基因可能與湖南省漢族女性ET發(fā)病相關(guān)。
　　論文2 Nogo受體作用蛋白4基因在湖南省漢族原發(fā)

6、性震顫患者中的變異檢測
　　目的: 檢測湖南省漢族原發(fā)性震顫(essential tremor，ET)患者LINGO4基因(the leucine-rich repeat and1g domain containing nogoreceptor-interacting protein4 gene，LINGO4)的基因變異，分析這些基因變異在湖南省漢族人群中的突變頻率，探討LINGO4基因是否與ET發(fā)病有關(guān)。
　　方法: 運用

7、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)方法(polymerase chainreaction-single strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)對100例ET患者進(jìn)行LINGO4基因編碼區(qū)的遺傳學(xué)分析，并用直接測序法確定這些變異的基因型。在150例患者（包括最初檢測的100例患者）和300例性別、年齡和種族相匹配的正常對照者中對檢測到的變異進(jìn)一步分析突變頻率差異。采用生物信息學(xué)軟件Mutation

8、 Taster對錯義突變進(jìn)行疾病預(yù)測。
　　結(jié)果: 1.對100例患者突變檢測后，我們發(fā)現(xiàn)了2個LINGO4基因變異(rs61746299和rs1521179)。rs61746299是錯義突變，為T＞A堿基替換，位于第2號外顯子，預(yù)測引起第444位氨基酸由蘇氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)榻z氨酸(Thr444Ser)。另1個變異rs1521179位于編碼區(qū)下游12bp，預(yù)測不改變剪切位點。2.在150例ET患者和300例性別、年齡和種族相匹配的正常對照

9、者中進(jìn)行全部2個變異位點(rs61746299和rs1521179)基因型頻率和等位基因頻率的分析，并沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(All P＞0.05)。隨后在家族性ET組、散發(fā)性ET組、早發(fā)型ET組和晚發(fā)型ET組的分層比較中也沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(All P＞0.05)。3.生物信息學(xué)軟件Mutation Taster對錯義突變進(jìn)行疾病風(fēng)險的預(yù)測分析，發(fā)現(xiàn)rs61746299蘇氨酸到絲氨酸的變異為多態(tài)。
　　結(jié)論: LINGO4基因可能