人結(jié)腸癌組織中B7-H4的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：觀(guān)察人結(jié)腸癌組織中B7-H4分子的表達(dá)水平，并初步探討B(tài)7-H4的表達(dá)與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及白細(xì)胞介素10 之間的聯(lián)系。
　　 方法：收集華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院胃腸外科結(jié)腸癌手術(shù)標(biāo)本60例（經(jīng)病理證實(shí)）。通過(guò)免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞分析方法，檢測(cè)癌組織與癌旁正常組織中B7-H4的表達(dá)水平；通過(guò)流式細(xì)胞分析方法檢測(cè)癌組織與癌旁正常組織中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（CD4+CD25+regulatory T cells，Tregs）的含

2、量；利用免疫磁珠分選試劑盒分選組織與健康人外周血來(lái)源的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與效應(yīng)性T細(xì)胞(CD4+CD25-conventional T cells，Tcons)，蛋白印跡（Western blotting）與流式細(xì)胞分析法檢測(cè)兩者中白細(xì)胞介素-10的含量；利用免疫磁珠分選試劑盒分選癌組織中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，并與健康人外周血單核細(xì)胞（PBMC）共培養(yǎng)48h，觀(guān)察調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對(duì)單核細(xì)胞上B7-H4的誘導(dǎo)表達(dá)影響。
　　 結(jié)果：1.免疫組織化

3、學(xué)顯示B7-H4在癌組織中表達(dá)明顯，而癌旁正常組織幾乎無(wú)B7-H4表達(dá)；流式細(xì)胞分析顯示，癌組織B7中-H4的陽(yáng)性表達(dá)率為62±8％，對(duì)應(yīng)的平均熒光強(qiáng)度（MFI）為2480±320；而癌旁正常組織中為10±2％，MFI 為400±80；兩者表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而且B7-H4是在腫瘤相關(guān)浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞（TAM）上表達(dá)。
　　 2.流式細(xì)胞分析顯示，F(xiàn)oxp3(調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表面標(biāo)志)在癌組織和癌旁正常組織CD3+

4、CD4+T細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)比例分別占22±5％和5±3％（P<0.05）；
　　 3.蛋白印跡顯示，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的IL-10 含量明顯高于同源效應(yīng)性T細(xì)胞；同時(shí)，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）顯示培養(yǎng)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與效應(yīng)T細(xì)胞的清液中IL-10的濃度分別為200±25pg/ml和50±8pg/ml，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)義；
　　 4.B7-H4 體外誘導(dǎo)顯示，將單核細(xì)胞與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞共培養(yǎng)48h后，其B7-H4陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)40±5