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文檔簡介
1、目的: 本文通過檢測基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)及誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA在無排卵型功能失調性子宮出血(簡稱無排卵型功血)患者子宮內膜組織中的表達情況,來進一步證實iNOS和MMP-9(又明膠酶B,GelatinaseB)作為子宮內膜局部調控因子在功血中的作用,以及子宮微環(huán)境的改變與無排卵型功血發(fā)病
2、機制的關系,從而為功能失調性子宮出血(簡稱功血)的非激素治療提供一些新的思路和途徑。 方法: 一、標本的采集分組 自2005年10月至2006年3月,于中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦科門診因不規(guī)則陰道流血就診并行刮宮的患者中采集無排卵型功血者的子宮內膜60例作為實驗組,平均年齡(39.21±3.71)歲,按世界衛(wèi)生組織(WHO,Scully RE等建議1994年)制定的標準分型,30例為單純性增生子宮內膜,另30例為
3、復雜性增生子宮內膜;對照組20例,為正常增生期的子宮內膜標本,取自同期在我科行子宮切除術的月經(jīng)周期正常的子宮肌瘤患者,平均年齡(42.47±2.08)歲。兩組研究對象要求3個月內未用過激素類藥物,一年內未放置宮內節(jié)育環(huán)。取材:于刮宮(或子宮離體)后5分鐘內迅速取子宮內膜組織,立即置入液氮中冷凍,4小時后再轉入.70℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?二、實驗方法 應用RT-PCR技術檢測iNOS及MMP-9mRNA在子宮內膜中的表達。
4、步驟包括: 1、采用RNAout試劑說明書所提供的方法進行總RNA的提取。 2、按RT-PCR試劑盒說明配制反應體系后進行反轉錄反應(RT)及聚合酶鏈反應(PCR)。 3、mRNA表達的半定量分析三、統(tǒng)計學分析結果以均數(shù)士標準差表示,并采用SPSS13.0軟件進行成組設計兩個獨立樣本t檢驗。 結果: 1、正常增生期子宮內膜組織中iNOS和MMP-9mRNA均表達。 2、無排卵型功血患者的子
5、宮內膜組織中iNOS mRNA表達水平明顯高于對照組,兩者之間的差異有顯著性意義(P<0.01)。 3、復雜增生組的子宮內膜iNOS mRNA的表達水平高于單純增生組,二者之間的差異具有顯著性意義(P<0.01)。 4、無排卵型功血患者的子宮內膜組織中MMP-9mRNA表達水平明顯高于對照組,兩者之間的差異有顯著性意義(P<0.01)。 5、復雜增生組的子宮內膜MMP-9mRNA的表達水平高于單純增生組,二者之間
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