N苯甲酰星孢菌素PKC412對(duì)膀胱癌細(xì)胞T24增殖和侵襲功能的影響.pdf

1、目的：觀察蛋白激酶C抑制劑N苯甲酰星孢菌素（N-benzoyl-staurosporine，PKC412）對(duì)膀胱癌細(xì)胞T24生長、增殖和侵襲能力的抑制作用及其對(duì)細(xì)胞周期的影響。 方法：體外培養(yǎng)膀胱癌細(xì)胞T24，加入不同濃度的PKC412（0．01μM、0．1μM、1μM、10μM）分別培育一定的時(shí)間（24h、48h、72h），軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)測(cè)定PKC412對(duì)T24細(xì)胞克隆形成的抑制作用，MTT比色試驗(yàn)測(cè)定PKC412對(duì)T24

2、細(xì)胞存活和生長的抑制作用，Transwell小室法檢測(cè)PKC412對(duì)T24細(xì)胞侵襲能力的抑制作用，流式細(xì)胞術(shù)周期測(cè)定法分析T24經(jīng)PKC412處理48小時(shí)后細(xì)胞周期的變化。 結(jié)果：軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)觀察到0．01μM PKC412對(duì)T24細(xì)胞克隆形成無抑制作用，自0．1μM～10μM，PKC412對(duì)T24細(xì)胞克隆形成抑制率逐漸上升，從5．46％～80．46％（P<0．05），呈時(shí)間和劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MTT試驗(yàn)觀察到

3、自0．01μM～10μM，PKC412對(duì)T24細(xì)胞存活和生長抑制作用逐漸增強(qiáng)，從1．17％～73．62％（P<0．05），呈時(shí)間和劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示T24細(xì)胞經(jīng)0．01μM～10μMPKC412作用48小時(shí)后，G0/G1期細(xì)胞比例逐漸下降，分別為70．22％、62．40％、41．08％和38．23％；而G2/M期細(xì)胞比例逐漸升高，分別為12．26％，17．71％，52．92％和58．41％，出現(xiàn)G2/M期細(xì)

4、胞阻滯。Transwell小室法觀察到PKC412作用24小時(shí)對(duì)T24細(xì)胞透膜能力無抑制作用，作用48h、72h后，自0．01μM～10μM，對(duì)T24細(xì)胞透膜抑制率逐漸增加，從12．06％～73．72％ （P<0．05），呈時(shí)間和劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1、PKC412能夠通過G2/M期細(xì)胞阻滯抑制T24細(xì)胞體外生長、增殖和克隆形成能力，呈時(shí)間和劑量依賴關(guān)系。 2、PKC412能夠抑制T24細(xì)胞的