納米羥基磷灰石涂層材料對犬自體靜脈內皮細胞細胞毒性的實驗研究與犬體內植入實驗的初步研究.pdf

1、背景:心臟瓣膜疾病是一類危及人類健康和生命的疾病,嚴重影響患者的工作和生活質量。瓣膜置換是治療心臟瓣膜疾病的有效方法。目前應用于臨床的主要有生物瓣膜和機械瓣膜,各有優(yōu)缺點:生物瓣膜容易鈣化、衰敗及破損撕裂,嚴重影響實際使用壽命;機械瓣膜需終生抗凝,以防止血栓形成。因而上述兩種人工心臟瓣膜在實際臨床應用中均受到了一定的限制。理想的人工心臟瓣膜應該是既有良好的使用壽命,又有很好的組織相容性,不會或者極少產生血栓。隨著組織工程技術的發(fā)展,運用

2、組織工程學原理構建的組織工程心臟瓣膜的研究便應運而生,理論上能克服生物瓣與機械瓣膜的不足之處,而且有良好的自我修復、重建能力等優(yōu)點,可成為理想的瓣膜,所以具有廣闊的臨床應用前景,也是目前組織工程化人工心臟瓣膜的研究熱點。
　　目的:體外培養(yǎng)法檢測納米羥基磷灰石材料涂層(nano-hydroxyapatite,NHA)對犬自體靜脈內皮細胞的細胞毒性,并種植與自體犬內觀察其表面內皮化情況,為運用組織工程學原理構建的組織工程瓣膜提供理想

3、的支架材料。
　　方法:第一部分:將獲取的犬自體大隱靜脈內皮細胞進行傳代培養(yǎng),取傳代培養(yǎng)細胞其中一部分行免疫熒光檢測;將剩余部分分為兩組,一組與納米羥基磷灰石涂層材料體外復合培養(yǎng),另外一組不加材料單獨接種培養(yǎng)作為對照組。分別收集第1,3,5,7天培養(yǎng)液,ELISA法檢測PGI2含量,以了解NHA材料對犬自體靜脈內皮細胞有無細胞毒性。第二部分:將納米羥基磷灰石涂層材料,人工機械瓣膜瓣葉材料分別植入犬右心房,掃描電鏡觀察了解材料表面內

4、皮細胞化情況。
　　結果:(1)獲取自犬大隱靜脈血管內壁的細胞傳代培養(yǎng)后經免疫熒光檢測為血管內皮細胞;其在納米羥基磷灰石涂層材料表面生長、粘附、增殖狀況良好,檢測PGI2的含量與空白對照組無明顯差異性(P>0.05)。(2)納米羥基磷灰石涂層材料植入右心房八周后,取出沖洗干凈,掃描電鏡觀察其表面形成內皮樣細胞;人工機械瓣膜瓣葉材料表面未見內皮細胞形成,見少量血栓附著。
　　結論:納米羥基磷灰石涂層材料對犬自體大隱靜脈血管內皮