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文檔簡介
1、目的:⑴通過在大鼠大腿背側(cè)坐骨神經(jīng)千周圍注射辣椒素制作神經(jīng)病理性疼痛模型,腹腔注射外源性給予降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)和CGRP受體拮抗劑CGRP8-37探討CGRP對辣椒素致痛大鼠熱痛覺過敏的影響。⑵探討CGRP是否參與初級感覺信息的調(diào)制,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù),觀察辣椒素致癇后大鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG)和相應(yīng)脊髓節(jié)段神經(jīng)元CGRP表達的變化。 方法:①將48只大鼠隨機分為6組,分別為:A組:正常對照組;B組:生理鹽水組;C組:
2、辣椒素注射組;D組:腹腔注射生理鹽水+辣椒注射組;E組:腹腔注射CGRP+辣椒注射組;F組:腹腔注射CGRP8-37+辣椒注射組。分別在實驗前及實驗后10、20、30、40、50、60 min進行熱板實驗。②將40只大鼠隨機分為5組,分別為:A組:正常對照組;B組:生理鹽水組;C組:辣椒素1h組;D組:辣椒素12 h組;E組:辣椒素24 h組。分別在1h、12 h、24 h后腹腔麻醉,以4%多聚甲醛(4℃)經(jīng)左心室升主動脈灌流固定,剝?nèi)?/p>
3、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓,經(jīng)固定、切片、免疫組化染色、鏡檢、計算機圖像分析。 結(jié)果:⑴注射辣椒素后大鼠的熱刺激縮足反射漸伏期(Paw withdraw thermal latency,PWTL)明顯縮短P<0.05)。⑵給予CGRP干預(yù)后,辣椒素致痛大鼠的PWTL比單獨注射辣椒素縮短P<0.05)。⑶給予CGRP8-37干預(yù)后,與CGRP干預(yù)組相比,大鼠的PWTL延長(P<0.05)。⑷生理鹽水組和辣椒素致痛1 h組大鼠的DRG神經(jīng)元C
4、GRP表達陽性率相比無明顯變化(P>0.05),陽性神經(jīng)元的灰度值有所升高(p<0.05);辣椒素致痛12 h組與辣椒素致痛1 h組相比大鼠的DRG神經(jīng)元CGRP表達陽性率明顯增加(P<0.05),陽性神經(jīng)元的灰度值顯著降低(p<0.05);辣椒素致癇24 h組與辣椒素致痛12 h組相比大鼠的DRG神經(jīng)元CGRP表達陽性率顯著增加(P<0.05),陽性神經(jīng)元的灰度值顯著降低(P<0.05)。⑸生理鹽水組和辣椒素致病1 h組大鼠的脊髓背角
5、CGRP表達陽性神經(jīng)元的灰度值明顯升高(P<0.05);辣椒素致痛12 h組與辣椒素致痛1h組相比大鼠脊髓背角CGRP表達陽性神經(jīng)元的灰度值顯著降低(P<0.05);辣椒素致痛24 h組與辣椒素致痛12 h組相比大鼠脊髓背角CGRP表達陽性神經(jīng)元的灰度值顯著降低(P<0.05)。⑹生理鹽水組和辣椒素致痛1h組大鼠的脊髓前角CGRP表達陽性神經(jīng)元的灰度值雖有所升高,但差異無顯著性(P>0.05);辣椒素致痛12 h組與辣椒素致病1h組相比
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