頭發(fā)中氫化可的松作為新型回溯性生物指證的研究.pdf

1、腎上腺皮質(zhì)激素氫化可的松是維持生命的必需激素，其體內(nèi)含量的多少對物質(zhì)代謝、血管反應(yīng)、神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)及消化系統(tǒng)的功能有不同程度的影響。氫化可的松也是心理應(yīng)激反應(yīng)的一個(gè)重要生物指證。
　　相對于唾液、尿液以及血液這些反映急性應(yīng)激的生物樣本，頭發(fā)中氫化可的松含量比較穩(wěn)定，可以評價(jià)長期的心理應(yīng)激。
　　首先，本文建立了三種頭發(fā)中氫化可的松的檢測方法。
　　第一，基于高效液相色譜-熒光檢測儀所建立的檢測方法，其檢測限可達(dá)1p

2、g/mg，萃取回收率可達(dá)103.3％，方法回收率102.5％，日內(nèi)精密度誤差可達(dá)7.3％，日間精密度可達(dá)8.5％。
　　第二，基于高效液相色譜-電噴霧-串聯(lián)質(zhì)譜儀，建立了一種檢測頭發(fā)中內(nèi)源性氫化可的松含量的方法。頭發(fā)樣品經(jīng)過清洗與研磨、甲醇提取和C18固相萃取后，選用電噴霧離子源，在負(fù)離子和多反應(yīng)監(jiān)測方式下進(jìn)行定性，以外標(biāo)法進(jìn)行定量。該分析方法的檢測限為0.5pg/mg，回收率在5ng/ml、20ng/ml、80ng/ml時(shí)分別為

3、121.2±3.7％、107.3±5.3％、101.3±6.6％，日內(nèi)精密度為7.6％，日間精密度為8.3％。
　　第三，基于一種新型號、靈敏度更高的質(zhì)譜儀，建立了一種新的同時(shí)檢測頭發(fā)中7種內(nèi)源性類固醇荷爾蒙（氫化可的松、可的松、睪酮、孕酮、皮質(zhì)酮、脫氫表雄酮、雄烯二酮）含量的方法。為了減少前處理時(shí)間，本方法使用完整的頭發(fā)和在線固相萃取，頭發(fā)樣品經(jīng)過清洗、甲醇提取后，選用大氣壓化學(xué)電離離子源，在正離子和多反應(yīng)監(jiān)測方式下進(jìn)行定性，以

4、內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。該分析方法的檢測限都等于或低于0.1pg/mg(脫氫表雄酮為0.9pg/mg)，日內(nèi)精密度和日間精密度的相對誤差和變異系數(shù)都小于15％。
　　其次，本文運(yùn)用上述檢測技術(shù)，研究了頭發(fā)氫化可的松推廣應(yīng)用的所關(guān)注的兩個(gè)關(guān)鍵問題:內(nèi)源性和回溯性。通過驗(yàn)證頭發(fā)中氫化可的松水平與唾液中氫化可的松水平的關(guān)聯(lián)性來驗(yàn)證頭發(fā)中氫化可的松的內(nèi)源性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)頭發(fā)氫化可的松含量和唾液氫化可的松含量線性相關(guān)顯著，這一結(jié)果間接表明血液的擴(kuò)散機(jī)制

5、是頭發(fā)中氫化可的松一個(gè)主要的內(nèi)源性來源。通過測定相同長度(1cm)頭發(fā)段中皮質(zhì)醇水平沿頭發(fā)桿軸的縱向分布規(guī)律來確定其回溯性和有效回溯期，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1cm長頭發(fā)段的氫化可的松含量從靠近頭皮的發(fā)根部分到遠(yuǎn)離頭皮的發(fā)梢部分呈現(xiàn)下降趨勢，這表明通過檢測1cm長的頭發(fā)段中的氫化可的松含量能夠反應(yīng)一個(gè)月內(nèi)人體內(nèi)源性氫化可的松分泌狀況的變化。并且通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了熱水洗發(fā)也是頭發(fā)中氫化可的松損失的原因。
　　最后，本文頭發(fā)氫化可的松應(yīng)用于四類人群的臨

6、床研究。第一，基于地震受災(zāi)人群，通過縱向研究設(shè)計(jì)來驗(yàn)證長期壓力、頭發(fā)氫化可的松和核心負(fù)面情感（焦慮和壓抑）之間的關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn)，地震會(huì)誘導(dǎo)人體內(nèi)的氫化可的松含量的升高，而且頭發(fā)中氫化可的松含量的改變會(huì)跟隨時(shí)間的變化而產(chǎn)生相應(yīng)的改變。在面對遭受地震誘導(dǎo)的延遲壓力的初級階段（地震后4周、6周、22周），地震受災(zāi)人群相對于參照組人群頭發(fā)氫化可的松含量的增長，地震后43周之后沒有發(fā)現(xiàn)頭發(fā)氫化可的松含量的變化。該發(fā)現(xiàn)首次驗(yàn)證料長期壓力誘導(dǎo)頭發(fā)氫

7、化可的松增長的時(shí)間特性。此后，相繼研究了創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)人群、阿狄森氏病病人(Addison's disease)和美沙酮維持治療受治(MMT)人群的應(yīng)激反應(yīng)模型。發(fā)現(xiàn)這些人群的頭發(fā)氫化可的松含量和參照組人群相比是存在顯著差異的，這個(gè)結(jié)論符合實(shí)驗(yàn)假設(shè)。
　　總之，本文驗(yàn)證頭發(fā)中氫化可的松可作為一種新型的可回溯生物指證，能夠有效、可靠地應(yīng)用于相關(guān)研究。這項(xiàng)研究將為干預(yù)焦慮、預(yù)防抑郁的發(fā)生提供客觀生化指標(biāo)依據(jù)，并且為氫化可的