化療藥物白消安-環(huán)磷酰胺聯(lián)用建立同種異基因小鼠的移植物抗宿主病(GVHD)模型.pdf

1、GVHD(移植物抗宿主病)是臨床上骨髓移植(BMT)的一種嚴(yán)重的并發(fā)癥。它的發(fā)生與宿主的免疫抑制有著重要的關(guān)系。在體內(nèi)試驗(yàn)中,我們建立了一種利用全身射線照射(TBI)來獲得小鼠免疫抑制的模型。并且,這個(gè)模型已經(jīng)廣泛的用于小鼠器官移植的各種實(shí)驗(yàn)中。
　　然而,臨床上使用具有免疫抑制功能的化療藥物正越來越多的代替了射線照射成為免疫抑制的主要手段,因此,我們有必要建立一種基于化療藥物的小鼠GVHD模型,以便更加緊密的貼近臨床工作的實(shí)際并

2、減少處理措施不同造成的差異。
　　本研究選取了雌性BalB/c小鼠作為受者,經(jīng)由白消安(busulfan,本文中以后簡(jiǎn)寫為BU)和環(huán)磷酰胺(cyclophsphamid,本文中以后簡(jiǎn)寫為BU)腹腔注射行免疫抑制處理,再以雄性C57BL/6小鼠作為供體,提取一定量的骨髓和脾細(xì)胞經(jīng)腹腔注射輸入受體體內(nèi),以模擬臨床上骨髓移植(BMT)的情形。然后觀察受者移植后的GVHD表現(xiàn)并進(jìn)行評(píng)分,并檢測(cè)器官和血液中的浸潤(rùn)情況等指標(biāo)(采用免疫組化技術(shù)

3、和流式細(xì)胞術(shù)),以觀察GVHD對(duì)主要實(shí)體器官(皮膚、大腸、肝)的損害情況?？紤]到GVHD的典型炎癥預(yù)期,提供移植前輸注HMGB1抗體的對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照。
　　結(jié)果顯示,經(jīng)上述處理后的受者小鼠,在移植后表現(xiàn)出了皺毛、皮損和體重減輕等典型GVHD等癥狀,模型的平均生存時(shí)間為12.23±2.41天。流式細(xì)胞術(shù)和免疫組化顯示血液和皮膚、大腸和肝等臟器浸潤(rùn)明顯。而HMGB1抗體對(duì)照組則浸潤(rùn)不明顯。說明經(jīng)由化療藥物BU-CY聯(lián)用誘導(dǎo)小鼠的免疫抑