環(huán)孢素A聯(lián)合鈷原卟啉防治小鼠移植物抗宿主病的研究.pdf

1、目的：研究環(huán)孢素A(CsA)聯(lián)合鈷原卟啉(CoPP)防治異基因造血干細(xì)胞移植(allo-HSCT)后小鼠移植物抗宿主病(GVHD)的作用。
　　方法：以C57BL/6小鼠為供鼠，BALB/c小鼠為受鼠，隨機(jī)分四組，分別為清髓照射對(duì)照組(TBI組，n=30)：60Co照射后4小時(shí)內(nèi)，尾靜脈注射0.3 ml PBS；常規(guī)異基因移植組(BS組，n=30)：TBI后，尾靜脈注射0.3ml骨髓細(xì)胞(BM)與脾細(xì)胞(SP)混合懸液；CsA干預(yù)

2、組(CsA組，n=30)：常規(guī)異基因移植后腹腔注射CsA；CsA聯(lián)合CoPP干預(yù)組(聯(lián)合組，n=30)：常規(guī)異基因移植后腹腔注射CsA和CoPP。移植后觀察受鼠一般狀況，定期稱量體重，記錄小鼠的生存時(shí)間并統(tǒng)計(jì)生存率，移植后5d、10d、15d、20d和30d，取受鼠外周血流式細(xì)胞術(shù)分析外周血T細(xì)胞亞群，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肌酐、尿素氮和尿酸濃度變化，獲取受鼠肝臟、小腸、皮膚標(biāo)本，觀察GVHD病理變化，行Masson染色觀察腎間質(zhì)纖維化情

3、況。熒光定量PCR檢測(cè)移植后15d受鼠腎血紅素加氧酶-1(HO-1)mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.移植后受鼠GVHD發(fā)生情況：與BS組和CsA組比較，聯(lián)合組移植后生存率較高(P<0.05)，體重下降較少且恢復(fù)較快(P<0.05)，GVHD臨床評(píng)分較低(P<0.05)，GVHD靶器官肝臟、小腸、皮膚病理?yè)p傷程度均較輕，病理評(píng)分均較低(P<0.05)，CD8+T細(xì)胞比例較低。2.鈷原卟啉可減輕CsA所致腎毒性：Masson染色可見(jiàn)

4、，CsA組小鼠腎間質(zhì)小管纖維化移植后逐漸加重，評(píng)分呈逐漸增高趨勢(shì)，而聯(lián)合組腎間質(zhì)小管纖維化少有發(fā)生，評(píng)分明顯低于CsA組(P<0.05)；CsA組小鼠移植后肌酐、尿素氮、尿酸均呈現(xiàn)開始逐漸增高后漸達(dá)穩(wěn)定趨勢(shì)，而聯(lián)合組肌酐、尿素氮、尿酸濃度無(wú)明顯增高趨勢(shì)，明顯低于CsA組(P<0.05)。3。CsA可下調(diào)受鼠腎HO-1 mRNA表達(dá)，而鈷原卟啉可逆轉(zhuǎn)這一效應(yīng)：移植后15d受鼠腎HO-1 mRNA熒光定量PCR顯示，CsA組HO-1 mRN