電化學(xué)活性高分子輔酶衍生物的制備及脫氫酶電化學(xué)生物傳感器的構(gòu)筑.pdf

1、本文將具有電化學(xué)活性的二茂鐵基團(tuán)(Fc)和生物活性的煙酰胺酰嘌呤二核苷酸(輔酶NAD+)同時(shí)連接到具有生物相容性的水溶性高分子聚乙烯亞胺(PEI)的骨架上，合成了電化學(xué)活性高分子輔酶衍生物PEI-Fc-NAD。
　　 紫外和紅外光譜表明二茂鐵和輔酶NAD+被固定到高分子骨架上。利用紫外分光光度法對(duì)其生物活性進(jìn)行了表征，結(jié)果表明，連接到高分子骨架上的NAD+分子具有生物活性，其酶促反應(yīng)符合米氏方程，但動(dòng)力學(xué)米氏常數(shù)比自由狀態(tài)的輔酶

2、NAD+高。
　　 利用循環(huán)伏安法和計(jì)時(shí)安培法研究了PEI-Fc-NAD在溶液狀態(tài)和固定化狀態(tài)下的生物電化學(xué)特性。實(shí)驗(yàn)中選用了兩種脫氫酶，乙醇脫氫酶(ADt{)和L-賴氨酸脫氫酶(LysDH)，分別采用了基于靜電力的層層自組裝技術(shù)(Layer-by-layeradsorption method，LBL)和聚乙二醇(PVA)包埋兩種固定化方法將酶固定化，構(gòu)筑了相關(guān)脫氫酶電化學(xué)傳感器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PEI-Fc-NAD無論是溶液狀態(tài)

3、下還是固定化狀態(tài)下均具有生物電化學(xué)活性，可以實(shí)現(xiàn)脫氫酶與電極之間的電子傳遞。
　　 通過LBL法分別構(gòu)筑了乙醇脫氫酶和L廠賴氨酸脫氫酶修飾電極，它們均對(duì)底物表現(xiàn)出特征電化學(xué)響應(yīng)，而且通過改變多層自組裝膜的層數(shù)可以有效控制修飾電極的電流響應(yīng)值。PEI-Fc-NAD與脫氫酶之間的靜電相互作用使得用此方法得到的修飾電極具有良好的穩(wěn)定性。
　　 本文合成的電化學(xué)活性高分子輔酶衍生物同時(shí)具有二茂鐵的電化學(xué)特性和輔酶的生物活性，可以