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文檔簡介
1、研究目的:心肌梗死后心室內壓力和容量負荷對梗死區(qū)的組織修復過程有重要影響。負荷過高易導致梗死區(qū)膨展和心室擴張,乃至心臟破裂;而降低壓力和容量荷后則有利于組織修復。但是,完全去除壓力和容量負荷的影響后,心肌梗死區(qū)的組織修復如何進行,尚未見到相關研究。此外,目前尚無一種方法能夠定量描述心肌梗死后組織修復過程中膠原纖維二維分布的動態(tài)演變,因此本研究的第二個目的是嘗試建立一種新方法以定量評價梗死區(qū)膠原纖維的分布特點。 研究內容與方法:利
2、用Lewis大鼠之間無免疫排異的特點,在腹腔異位心臟移植的基礎上,同時結扎供體心臟的冠狀動脈引起心肌梗死,建立一種“左心室去負荷心肌梗死”模型。在模型建立后第3天,7天,14天和35天分別處死一批動物,動態(tài)研究供體心臟在完全去除壓力和容量負荷后梗死區(qū)的組織修復過程。同時建立Lewis大鼠原位心肌梗死模型,在相同時點與移植心臟梗死區(qū)的組織修復過程進行橫向比較。采用苦味酸天狼猩紅.偏振光法對心肌梗死區(qū)膠原纖維沉積量、成熟程度的動態(tài)變化進行病
3、理學分析。利用加利福尼亞大學生物醫(yī)學工程系編寫的Continuity軟件對梗死區(qū)膠原纖維角度向量進行自動識別并結合有關圓分布統(tǒng)計分析方法,篩選與膠原纖維二維分布動態(tài)變化一致的統(tǒng)計學參數(shù)。采用免疫熒光染色對梗死區(qū)新生小動脈密度進行病理學分析。利用凝集素熒光染色對非梗死區(qū)心肌細胞橫截面積進行動態(tài)分析。利用明膠酶譜法檢測梗死區(qū)基質金屬蛋白酶-2和-9(MatrixMetalloproteinase,MMP)活性的動態(tài)變化。以Westernbl
4、ot法檢測梗死區(qū)MMP-2、MMP-9,轉化生長因子β-1(TransformingGrowthFactorβ-1,TGF-β1)和基質衍生因子-1(StromalDerivedFactor-1,SDF-1)的蛋白相對含量。 結果:經(jīng)膠原纖維角度自動識別結合圓分布統(tǒng)計分析后,反映膠原纖維角向量圓分布離散趨勢的3個統(tǒng)計學參數(shù)(圓分布方差、圓分布標準差和離散常數(shù))與心肌梗死后的不同時點間呈負相關。反映膠原纖維角向量圓分布集中趨勢的兩
5、個統(tǒng)計學參數(shù)(平均合成長度、圓分布集中常數(shù))與心肌梗死后的不同時點間呈正相關。故上述5個參數(shù)能夠定量描述梗死區(qū)膠原纖維二維排列由紊亂向有序的動態(tài)發(fā)展過程。移植心臟梗死區(qū)隨時間延續(xù),膠原纖維排列紊亂程度呈進行性增加的趨勢。利用上述5個參數(shù),可定量描述這一過程。移植心臟梗死區(qū)的膠原合成量、成熟度均低于原位心肌梗死區(qū)。移植心臟梗死區(qū)小動脈密度自術后14天起,均高于原位梗死組。移植心臟的重量和非梗死區(qū)心肌細胞橫截面積呈進行性減小的趨勢,同時伴有
6、細胞外基質沉積增多。至觀察終點時,相對與原位梗死組,移植心臟梗死區(qū)仍然存在大量炎癥細胞浸潤。術后第14天,移植心臟梗死區(qū)MMP-9的蛋白含量和活性以及TGF-β1蛋白含量均明顯高于同一時間點的原位梗死組,而MMP-2和SDF-1與同一時間點原位梗死區(qū)相比無明顯差異。 結論:自動角度識別結合圓分布統(tǒng)計分析,是一種能夠定量評價心肌梗死區(qū)膠原纖維二維分布的新方法。左心室去負荷狀態(tài)下,心肌梗死后的組織修復是一種以膠原纖維合成量下降、成熟
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