蛇床子素抑制小鼠酒精性脂肪肝的形成及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究蛇床子素對酒精性脂肪肝的預(yù)防作用及其可能作用機(jī)制。 方法：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用小鼠建立酒精性脂肪肝模型，觀察蛇床子素對酒精性脂肪肝的預(yù)防作用以及抗氧化能力；采用RT-PCR方法，分別觀察蛇床子素對PPARα/γmRNA、DGATmRNA、HMG-CoA還原酶mRNA和CYP7A mRNA表達(dá)的影響。體外實(shí)驗(yàn)采用大鼠肝細(xì)胞BRL細(xì)胞株，用1640培養(yǎng)基適應(yīng)性培養(yǎng)后，平均分到6孔板中，待細(xì)胞貼壁后，分別用含有25、50、100和2

2、00μg／ml蛇床子素的無血清培養(yǎng)基和含力平之200μg/ml的無血清培養(yǎng)基作用24 h，然后用RT-PCR法檢測細(xì)胞中PPARamRNA、DGAT mRNA、HMG-CoA還原酶mRNA和CYP7A mRNA的表達(dá)。為進(jìn)一步明確蛇床子素的作用機(jī)制是否與PPARα途徑有關(guān)，又分別觀察了BRL細(xì)胞用新鮮無血清培養(yǎng)基、含有200μg/ml蛇床子素的無血清培養(yǎng)基、含有1μmoVLMK886(為PPARtα抑制劑)的無血清培養(yǎng)基、含有1μ mo

3、l/L MK886+200μg/ml蛇床子素的無血清培養(yǎng)基(先以1μmol/L MK886預(yù)處理2h，再加入200μg/ml蛇床子素)作用24h，再用RT-PCR檢測對PPARα調(diào)控的靶基因表達(dá)的影響。 結(jié)果：酒精性脂肪肝小鼠預(yù)防給予蛇床子素10-40 mg/kg 4周后，能降低血清TC和TG(P<0.01)，也能降低肝組織中的TC、TG、MDA、TNF-α含量和肝重系數(shù)(P<0.05或P<0.01)，并有一定的劑量依賴趨勢。蛇

4、床子素也增加肝組織中GSH含量(P<0.01)。光鏡檢查結(jié)果顯示，給予蛇床子素的小鼠肝細(xì)胞脂肪變性程度明顯減輕。RT-PCR檢測結(jié)果顯示，蛇床子素可明顯上調(diào)酒精性脂肪肝小鼠肝組織中PPARα/γmRNA和CYP7A mRNA的表達(dá)(P<0.05或P<0.01)，下調(diào)DGAT mRNA和HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)(P<0.05或P<0.01)。在體外培養(yǎng)的BRL細(xì)胞上，蛇床子素也可上調(diào)PPARct mRNA和CYP7A mRNA的表

5、達(dá)(P<0.05或P<0.01)，下調(diào)DGAT mRNA和HMG-CoA還原酶mRNA的表達(dá)(P<0.05或P<0.01)，而且在使用PPARa抑制劑MK886后，蛇床子素對DGAT mRNA、HMG-CoA還原酶mRNA和CYP7A mRNA表達(dá)的影響被完全取消。 結(jié)論：蛇床子素10.40 mg/Kg給 T藥4周后，對小鼠酒精性脂肪肝有較好的預(yù)防作用，其作用機(jī)制可能與其通過上調(diào)PPARα/γ基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)它們的下游靶基因