胰島素抵抗與非酒精性脂肪肝的相關(guān)性及其部分機(jī)制的研究.pdf

1、研究目的：旨在通過對(duì)目標(biāo)人群的體檢資料、血清指標(biāo)、人體成分的分析,以及人正常肝細(xì)胞L02的體外培養(yǎng),研究機(jī)體在IR狀態(tài)下與脂質(zhì)血癥與肝臟損傷的關(guān)系,對(duì)比不同胰島素水平的刺激所造成的肝臟細(xì)胞PGC-1α表達(dá)水平的變化,以及PGC-1α的表達(dá)失衡所致肝臟細(xì)胞能量代謝異常、肝臟線粒體損傷,及與肝脂肪堆積關(guān)系,有助于進(jìn)一步闡明NAFLD的發(fā)病機(jī)制,從而提供一定的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　研究方法：本次研究對(duì)象選擇某大學(xué)附屬醫(yī)院的體檢人群,

2、內(nèi)容包括病史采集、體格檢查、生化指標(biāo)的檢測(cè)、肝臟彩超檢查。將研究對(duì)象分為NAFLD組和對(duì)照組,分析兩組的一般情況,生化指標(biāo)的比較,代謝綜合征(metabolicsyndrome,MS)及其組分的患病率,NAFLD組的危險(xiǎn)因素以及NAFLD組的體脂、血脂與IR指標(biāo)的相關(guān)分析。再進(jìn)一步通過高濃度胰島素誘導(dǎo)L02細(xì)胞建立IR模型;用透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)觀察未加胰島素和胰島素誘導(dǎo)

3、組下的肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化;取未加胰島素和胰島素誘導(dǎo)組下的人肝細(xì)胞系L02細(xì)胞用于RT-PCR半定量方法測(cè)定PGC-1αmRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、NAFLD組較對(duì)照組的SBP、DBP、FBS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST、UA、FFA、FINS、BMI、WC、WHR、VFA、HOMA-IR及體脂百分比增高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　2、NAFLD組MS及其組分(肥胖癥、高

4、TG血癥、低HDL-C血癥、血壓增高、FBS異常)的患病率均較對(duì)照組高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　3、NAFLD組FINS與TG、FFA、BMI、WC呈正相關(guān)(P<0.05,P<0.01),FINS與與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。NAFLD組HOMA-IR與TG、FFA、BMI、WC、WHR呈正相關(guān)(P<0.05,P<0.01),HOMA-IR與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。
　　4、以正常人肝細(xì)胞系

5、L02細(xì)胞提取得到的總RNA為模板,非特異擴(kuò)增出PGC-1α基因和β-actin基因,目的條帶大小分別約為247bp和100bp。胰島素組均較對(duì)照組數(shù)值PGC-1αmRNA增高,且胰島素E組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　5、電鏡下觀察顯示:對(duì)照組即未加胰島素組,可見細(xì)胞形態(tài)大小不一,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈軌道樣排列,線粒體小而多,嵴較完整,少見脂滴出現(xiàn)。胰島素誘導(dǎo)組隨著濃度加大,可見脂滴逐漸積累,細(xì)胞線粒體的數(shù)量減少、結(jié)構(gòu)不清,嵴