柴胡疏肝散對(duì)非酒精性脂肪肝胰島素抵抗大鼠的防治作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過高脂高糖乳劑復(fù)制非酒精性脂肪肝?。∟AFLD）胰島素抵抗大鼠模型并以柴胡疏肝散進(jìn)行干預(yù)，探討柴胡疏肝散對(duì)NAFLD胰島素抵抗大鼠的防治作用及其可能作用機(jī)制，以期為臨床應(yīng)用柴胡疏肝散防治NAFLD提供進(jìn)一步科學(xué)依據(jù)。
　　方法：取SD大鼠48只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、東寶肝泰組（0.09g蛋氨酸/kg）、柴胡疏肝散高、中、低劑量組(12.6、6.3、3.15g生藥/kg)。除正常組外，其余各組ig高脂高糖乳劑

2、建立NAFLD大鼠模型，造模同時(shí)分別給各給藥組ig相應(yīng)藥物，正常組、模型組ig生理鹽水，連續(xù)8周。實(shí)驗(yàn)期間，每天記錄大鼠的生長狀況，每周定期稱量并記錄大鼠的體重。于第8周末，所有大鼠用3％戊巴比妥鈉（按劑量1ml/kg）進(jìn)行麻醉，腹主動(dòng)脈取血并及時(shí)摘取肝臟。肉眼觀察各組大鼠肝臟形態(tài)變化并及時(shí)稱量濕重，光鏡下觀察肝細(xì)胞病理形態(tài)變化并對(duì)脂肪變性程度進(jìn)行分級(jí)，測(cè)定各組大鼠血脂、肝脂、肝功能、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、總谷胱甘

3、肽（T-GSH）、空腹血糖、胰島素,并計(jì)算肝指數(shù)、胰島素抵抗指數(shù)（IR）、胰島素敏感指數(shù)（ISI）、胰島素分泌指數(shù)(HOMA-IS)，RT-PCR法檢測(cè)肝臟脂聯(lián)素（Adiponectin）和瘦素（Leptin） mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA、FBG、FINS、IRI、AST、ALT水平顯著升高（P＜0.01），血清HDL-C、ISI、HOMA-IS水平顯著降低（P＜0.01

4、），肝指數(shù)及肝臟TC、TG、MDA水平均顯著升高（P＜0.01），肝臟SOD活性明顯下降，肝臟Adiponectin mRNA表達(dá)量明顯減少（P＜0.01）、Leptin mRNA表達(dá)量明顯增多（P＜0.01）；肝臟病理切片顯示模型組大鼠肝細(xì)胞索排列紊亂，肝小葉界限不清，肝竇消失，肝細(xì)胞體積明顯增大、呈腫脹狀,出現(xiàn)彌漫性脂肪變性。與模型組比較，柴胡疏肝散各劑量組血清TC、TG、FFA、AST、ALT、FBG、FINS、IRI水平顯著降低

5、（P＜0.05，0.01），血清HDL-C、ISI、HOMA-IS水平顯著升高（P＜0.01），中、高劑量組血清LDL-C水平顯著降低（P＜0.01）；各劑量組肝臟TC、TG水平均顯著降低（P＜0.01），中劑量組肝臟 MDA含量顯著下降（P<0.01）；各劑量組肝臟Adiponectin mRNA水平水平顯著上調(diào)（P＜0.01)，各劑量組肝臟Leptin mRNA水平顯著下調(diào)(P＜0.01)；各劑量組肝指數(shù)水平、肝臟SOD活性和T-G

6、SH含量只呈一定劑量變化趨勢(shì)但無顯著性差異。肝臟病理切片顯示柴胡疏肝散可明顯減輕NAFLD胰島素抵抗大鼠肝細(xì)胞脂肪變性、水樣變性及炎癥細(xì)胞浸潤等病理癥狀。
　　結(jié)論：本課題以高脂高糖乳劑灌胃八周復(fù)制的NAFLD胰島素抵抗大鼠模型與現(xiàn)代人類日常飲食所致的NASH代謝改變相似，存在相同的發(fā)病機(jī)制，是較理想的NASH模型。
　　柴胡疏肝散可有效減輕NAFLD大鼠肝臟脂肪變性，降低血清脂質(zhì)、FFA、肝臟脂質(zhì)水平及肝臟脂質(zhì)過氧化程度，

7、提高胰島素敏感性和改善肝功能，顯著上調(diào)脂聯(lián)素的表達(dá)和下調(diào)瘦素的表達(dá),對(duì)NAFLD具有較好的防治功效。其可能的作用機(jī)制為：(1)通過增強(qiáng)外周脂肪酸氧化能力、減少外源性脂質(zhì)的吸收、降低內(nèi)源性脂質(zhì)的生成及提高肝臟脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)來減輕機(jī)體脂質(zhì)的蓄積；（2）通過消除肝臟大量的ROS和自由基來增強(qiáng)肝臟抗氧化應(yīng)激能力；（3）通過穩(wěn)定肝細(xì)胞膜,修復(fù)損害的肝細(xì)胞，減輕肝細(xì)胞變性壞死,促進(jìn)肝細(xì)胞再生來保護(hù)肝細(xì)胞；（4）通過降低血糖和體內(nèi)胰島素水平和增強(qiáng)胰島素敏