EB病毒對臍帶血樹突狀細胞分化和功能的影響.pdf

1、目的：通過建立EB病毒（Epstein-Barr Virus，EBV）感染單核細胞和樹突狀細胞（dendritic cell，DC）的培養(yǎng)體系，研究臍帶血單核細胞和DC的EBV相關蛋白的表達，探討EBV對臍帶血DC吞噬功能、表面分化和成熟標記表達以及細胞因子分泌功能的影響，并且與相同培養(yǎng)條件下成人外周血單核細胞和DC比較，研究兩者在病毒相關蛋白表達及細胞分化和功能變化方面的差異性。以期從抗原提呈細胞這一免疫應答的起始環(huán)節(jié)，來闡明EBV逃

2、逸宿主免疫監(jiān)視的可能機制，為臨床防治EBV感染提供理論和實驗依據(jù)。 方法：采用RT-熒光定量PCR方法檢測病毒相關蛋白基因在單核細胞和DC上的差異性表達。采用流式細胞儀檢測細胞表面病毒相關蛋白的表達、DC吞噬葡聚糖的能力、以及細胞表面分化和成熟標記表達的陽性率和相對熒光強度。采用ELISA方法和RT-熒光定量PCR方法分別檢測DC分泌細胞因子的水平和細胞因子mRNA的表達。 結果：在感染EBV的臍帶血單核細胞表面檢測到了

3、病毒相關蛋白早期抗原（early antigen，EA）和衣殼抗原（virus capsid antigen，VCA）的表達。RT-熒光定量PCR檢測到病毒相關蛋白潛伏膜蛋白1（Latent membrane protein 1，LMP1）和BcLF-1的mRNA表達，并且成人外周血單核細胞和DC內(nèi)LMP1蛋白基因模板的拷貝數(shù)明顯高于臍帶血單核細胞和DC。感染EBV后，臍帶血DC吞噬葡聚糖的能力降低；細胞表面分化和成熟標記與正常對照相比

4、表現(xiàn)為：CD14分子的下調(diào)不明顯，而MHC Ⅱ類分子和協(xié)同刺激分子上調(diào)不明顯，MHCⅠ類分子的表達降低；細胞因子分泌的改變表現(xiàn)為：LPS刺激后細胞分泌的IL-6、IL-10和TNF-α不增高，而TGF-β1在EBV感染后分泌增高，同時EBV還抑制了IL-12p35和IFN-γ的mRNA表達。 結論：單核細胞和未成熟DC均可被EBV感染，并且由于成人外周血單核細胞和DC內(nèi)LMP1蛋白mRNA的拷貝數(shù)明顯高于臍帶血單核細胞和DC，推