人類β1，3半乳糖基轉移酶7對HL-60細胞增殖與侵襲特性的影響.pdf

1、目的：β 1，3半乳糖基轉移酶7(β3GalT7)是β3糖基轉移酶大家族的一個新成員。蛋白質O-糖基化的改變與細胞黏附和腫瘤轉移密切相關，有研究提示該酶可能與腫瘤的生物學行為有關。本文通過上調及抑制β3GalT7基因在HL60細胞中的表達，來探討β3GalT7基因對HL60細胞的生長、增殖、侵襲能力等方面的影響。 方法：通過脂質體介導將重組載體pEGFP-C1，pEGFP-C1-T7-Sense，pEGFP-C1-T7-Anti

2、sense)轉染入HL60細胞；利用MTT法檢測細胞增殖情況的變化，并用流式細胞儀分析各細胞株的細胞周期的改變以及Transwell侵襲實驗檢測其對HL60細胞侵襲轉移能力的影響；運用RT-PCR和Western blot檢測浸潤轉移相關功能基因TGFβ1、MMP2、。MMP14在mRNA水平和蛋白質水平的表達變化。將隨機分成HL60組、HL60-0組、HL60-S組和HL60-AS組的裸鼠(BAm/c)分別給予各亞細胞株皮下接種以構建

3、人粒細胞白血病HL60細胞異種移植瘤，并觀察致瘤時間和瘤的大小，組間對照進行統(tǒng)計學分析；對瘤組織進行病理形態(tài)學觀察，并通過半定量RT-PCR檢測瘤組織中β3GalT7的表達。 結果：隨著β3GalT7基因表達的增高，細胞生長增殖加快，反之亦然。體外穿膜實驗結果顯示轉染正義組細胞侵襲能力高于對照組(P

4、，MMP2、MMP14在mRNA水平和蛋白質水平的表達下調。而β3GalT7和TGFβ1的表達則呈負相關。接種HL60-S細胞的裸鼠成瘤時間明顯縮短，成瘤率為100％，腫瘤終體積和重量均明顯大于接種HL60細胞組的裸鼠(P<0.01)；接種HL60-AS細胞裸鼠成瘤時間明顯延長，成瘤率為80％，腫瘤終體積和重量均明顯小于接種HL60細胞組裸鼠(PO．05)