α1,3巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶-Ⅶ在人肝癌細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)移中的作用.pdf

1、3口復(fù)旦大碩士學(xué)位學(xué)淪文Ⅱl，3巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶一VII在人肝癌細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)移中的作用Rolesofnl，3fllcOsyItransf色rase—VIIinapoptosisandmetastasisofhumanhepatocarcinomacelIs院系：專業(yè)：姓名：指導(dǎo)教師：上海醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)王瓊中宗侯教授完成同期：2008年5月n13巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶～VII在人肝癌細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)移中的作用摘要口巴Ⅱ13巖藻挑基轉(zhuǎn)移酶一v

2、兒(簡稱FuT7)住于真飲細(xì)胞的高爾肇體中是卜要催化唾液酸化的Lewis抗原sLe。巖藻耱蕈化的一個終米糖罄轉(zhuǎn)移酶，它使糖鏈的加工終止，精鏈結(jié)構(gòu)不再改變。細(xì)胞凋亡是由多個基因嚴(yán)格控制的細(xì)胞程序惟死亡過程，它與|年多臨床疾病都密切相關(guān)而細(xì)胞凋亡異常則與太多數(shù)惡性腫瘤的欲，和轉(zhuǎn)移柯關(guān)。腫瘤轉(zhuǎn)移是一個非常復(fù)雜的過程，而它正是最終導(dǎo)致腫瘤病人北I’：的1：要原因。為了研究FuT7在人肝癌細(xì)胞株sMMc772I(1l；j稱7721)周l!及轉(zhuǎn)移中

3、的作用，我們采用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞的方法將FuT7cDNA轉(zhuǎn)染到低表達(dá)FuT7的772I細(xì)胞中觀察轉(zhuǎn)染FuT7質(zhì)粒后在772l細(xì)胞巾所產(chǎn)生的一系列生物學(xué)效麻。我們的研究分為二個部分。首先，由于H202是一種常用的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑，我們用終濃度為ImM的H202處理細(xì)胞，12小時(shí)后可咀檢測到明顯的細(xì)胞稠亡發(fā)‘#同時(shí)FIJT7的mRNA水平也有顯著的上刀，這就提示FuT7u】能參與調(diào)節(jié)H202輯導(dǎo)的772I細(xì)胞的凋亡。接下來我們構(gòu)建了pcDNA3一

4、FuT7質(zhì)粒，用它轉(zhuǎn)染772】細(xì)胞并篩選出穩(wěn)定表達(dá)FuT7的細(xì)胞克隆。再用H202處理細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)過表達(dá)FuT7的細(xì)胞凋亡水平明顯低于轉(zhuǎn)染空載體的對照細(xì)胞，并且過表選FuT7的細(xì)胞中口38MAPK的磷酸化水平也明顯高于對照細(xì)胞，以上結(jié)果說明FuT7在H202誘導(dǎo)的772l細(xì)胞凋亡過程中具有抗凋亡作用，并且這種作用至少部分通過增強(qiáng)p38MAPK信號通路括性來實(shí)現(xiàn)。最后，由于本實(shí)驗(yàn)室前期研究工作發(fā)現(xiàn)在7721細(xì)胞中過表達(dá)FuT7可以通過增強(qiáng)I