β1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶I與細(xì)胞間黏附分子1在著床調(diào)控中的相關(guān)性探討.pdf

1、目的：探討著床前子宮內(nèi)膜細(xì)胞β1，4-GalT-Ⅰ的表達(dá)及調(diào)控β1，4-GalT-Ⅰ對細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)表達(dá)的影響，分析β1，4-GalT-Ⅰ與ICAM-1在胚胎著床過程中的相關(guān)性。
　　 β1，4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ(β1，4-GalT-Ⅰ)分布于高爾基體和細(xì)胞膜兩種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)上，位于高爾基體上的β1，4-GalT-Ⅰ可行使蛋白質(zhì)的糖基化修飾功能；位于細(xì)胞膜上的β1，4-GalT-Ⅰ則作為一種細(xì)胞黏附分子，參與細(xì)胞

2、黏附、精卵識別、神經(jīng)軸突的生長、腫瘤細(xì)胞遷移等過程。
　　 細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)既是一類重要的黏附分子，也是一種跨膜糖蛋白，它在早期胚泡發(fā)育、子宮內(nèi)膜容受性的建立及胚泡著床過程中有重要作用。
　　 方法：利用人源的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞(RL95-2)模擬著床前子宮內(nèi)膜，人源的絨毛癌細(xì)胞(JAR)模擬胚泡來組成體外著床模型[1]，將β1，4-GalT

3、-Ⅰ基因過表達(dá)質(zhì)粒(HA-GalT-Ⅰ)以及空載體質(zhì)粒(pCDNA3.0)轉(zhuǎn)染RL95-2細(xì)胞使其過表達(dá)β1，4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ，通過細(xì)胞熒光檢測確定轉(zhuǎn)染效果，采用RT-PCR、Western-blot等方法檢測調(diào)控β1，4-GalTI表達(dá)對ICAM-1表達(dá)的影響，檢測JAR細(xì)胞在RL95-2細(xì)胞上的黏附率判斷二者在胚胎著床調(diào)控中的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：轉(zhuǎn)染β1，4-GalT-Ⅰ過表達(dá)質(zhì)粒HA-GalT-Ⅰ后60小時，RL95

4、-2細(xì)胞中有綠色熒光蛋白的表達(dá)，RT-PCR及Western-blot分析結(jié)果顯示：與正常培養(yǎng)組、空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組相比，過表達(dá)HA-GalT-Ⅰ組β1，4-GalT-Ⅰ的表達(dá)量增高，ICAM-Ⅰ的基因表達(dá)和蛋白合成也隨之增加；過表達(dá)HAGalT-Ⅰ后JAR細(xì)胞在RL95-2細(xì)胞上的黏附率(78.5％)也明顯高于正常培養(yǎng)組(65.4%)和空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(62.5%)，(p＜0.05)，說明上調(diào)β1，4-GalT-Ⅰ會促進(jìn)ICAM-1表達(dá)及提高胚