大腸癌組織中Hedgehog信號通路組分蛋白的異常表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　 大腸癌是世界范圍內(nèi)發(fā)病率最高的癌癥之一。隨著我國人民生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變以及環(huán)境污染的加重，我國大腸癌的發(fā)病率逐年升高。流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示：我國已經(jīng)進(jìn)入大腸癌高發(fā)地區(qū)的行列，大腸癌發(fā)病率40/10萬，已接近西方發(fā)達(dá)國家水平，在腫瘤發(fā)病率排名中已由原來的第6位上升至第2位。然而，人們對大腸癌的具體發(fā)病機(jī)制仍缺乏完整的認(rèn)識(shí)。目前，針對該疾病尚無可靠有效的治療措施。
　　 Hedgehog信號通路在胚胎

2、發(fā)育、多種器官的形成及形態(tài)維持中扮演著重要角色。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)Hh信號通路的異常激活參與多種消化系統(tǒng)惡性腫瘤的形成與發(fā)展，例如胃癌、食管癌、胰腺癌等。因此，探討Hh信號通路在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用，尋找大腸癌診斷與治療相關(guān)的新靶點(diǎn)對于大腸癌的防治具有非常重要的意義。
　　 研究目的：
　　 1、研究人體大腸癌粘膜癌變過程中Hh信號通路負(fù)調(diào)控因子SuFu以及下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1的表達(dá)變化規(guī)律；
　　

3、2、分析SuFu與Gli1的表達(dá)水平與其臨床病理參數(shù)(病理類型、腫瘤分期、浸潤深度等)之間關(guān)系；
　　 3、分析SuFu以及Gli1與大腸癌患者總生存率及無瘤生存率之間的關(guān)系；
　　 4、探討Hh信號通路重要組分SuFu和Gli1對大腸癌病情預(yù)測的臨床價(jià)值。研究方法：
　　 一、臨床標(biāo)本的選取
　　 大腸正常粘膜組織標(biāo)本來源于2011年4月至2011年9月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心內(nèi)鏡下活檢樣本，共

4、98例。大腸腺瘤組織標(biāo)本來源于2007年1月至2009年6月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心內(nèi)鏡下切除后病理科所保存蠟塊，共99例。大腸癌組織標(biāo)來源于2007年1月至2009年6月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院普外科大腸癌根治術(shù)后病理科所保存蠟塊，共177例。臨床標(biāo)本要求患者既往無腫瘤病史，無潰瘍性大腸炎，克羅恩病，腺瘤等其他疾病，年齡滿18歲以上的健康成人，并在取樣本前充分告知患者標(biāo)本用途，并取得患者同意，記錄患者姓名、年齡、性別、聯(lián)系方式。針

5、對病理科蠟塊標(biāo)本，在病案室查詢病案，記錄患者姓名、年齡、性別、聯(lián)系方式、病理診斷、腫瘤部位、腫瘤分期、腫瘤浸潤深度、手術(shù)時(shí)間、原發(fā)或復(fù)發(fā)等。隨訪對象為2007年1月1日至2009年6月1日，經(jīng)南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院行大腸癌根治切除術(shù)患者。所有患者在大腸癌根治術(shù)前均未行相關(guān)放療、化療及免疫治療，且術(shù)前的影像學(xué)檢查及術(shù)中探查均未提示有腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。術(shù)后大腸癌標(biāo)本均經(jīng)過南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科病理證實(shí)，切緣未見癌組織。排除標(biāo)準(zhǔn)：同時(shí)或既往惡

6、性腫瘤病史、潰瘍性大腸炎、克羅恩病、家族性腺瘤樣息肉病、多原發(fā)大腸癌患者。
　　 二、Hedgehog信號通路重要組分蛋白的檢測
　　 利用HE染色再次確認(rèn)374例標(biāo)本的病理診斷，將各組臨床病理標(biāo)本固定脫水后制成石蠟切片，通過免疫組織化學(xué)二步法檢測Hh信號通路重要組分蛋白SuFu及Gli1蛋白的表達(dá)；采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)、Kruskal-WallisH檢驗(yàn)、Spearmanrankcorrelation分析

7、檢驗(yàn)、Kaplan-Meier生存期分析檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)方法分析大腸粘膜癌變過程中SuFu和Gli1蛋白表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
　　 三、大腸癌患者隨訪
　　 通過病案室查閱相關(guān)患者病歷資料的方式收集大腸癌患者相關(guān)的臨床資料及病理資料(患者姓名、年齡、性別、病案號碼、病理號碼、手術(shù)時(shí)間、病理類型、病理分期、化療方案及周期)。通過電話隨訪及門診復(fù)查等方式對相應(yīng)患者的預(yù)后進(jìn)行隨訪，隨訪時(shí)間由手術(shù)當(dāng)日起計(jì)算，補(bǔ)充未記錄的患者

8、疾病進(jìn)展情況及最后隨訪時(shí)間，是否仍存活及死亡時(shí)間。
　　 研究結(jié)果：
　　 一、SuFu在正常大腸粘膜、大腸腺瘤、大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義
　　 1.在正常大腸粘膜向大腸癌癌變過程中，Hh信號通路的負(fù)調(diào)控因子SuFu蛋白的表達(dá)呈逐漸下降趨勢，甚至在部分大腸癌組織中表達(dá)缺失。SuFu蛋白的表達(dá)在正常大腸粘膜、大腸腺瘤、大腸癌組織中的陽性表達(dá)率分別為100％，96.9％，41.2％，其中大腸癌組織中SuFu蛋白的表

9、達(dá)明顯低于正常大腸粘膜組及大腸腺瘤，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；
　　 2.SuFu蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤病理類型、腫瘤分化程度均無明顯相關(guān)(p>0.05)；
　　 3.SuFu的蛋白表達(dá)與患者腫瘤部位相關(guān)，其中直腸癌中的SuFu蛋白表達(dá)量明顯低于其他部位腫瘤(p<0.05)；
　　 4.SuFu的蛋白表達(dá)與腫瘤的TNM分期相關(guān)，其中晚期大腸癌患者的SuFu蛋白的陽性表達(dá)率明顯低于早期大腸癌患

10、者(p<0.05)；
　　 5.SuFu的蛋白表達(dá)與腫瘤的浸潤深度相關(guān)，其中侵犯至漿膜外的腫瘤SuFu的陽性表達(dá)率明顯低于其他各組(p<0.05)。
　　 二.、Gli1在正常大腸粘膜、大腸腺瘤、大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義
　　 1.在正常大腸粘膜向大腸癌癌變過程中，Hh信號通路的下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白的表達(dá)呈逐漸上升趨勢。Gli1蛋白在正常大腸粘膜組織、大腸腺瘤、大腸癌組織中的陽性表達(dá)率分別為34.69％，6

11、9.38％，74.01％，其中Gli1蛋白的表達(dá)在正常大腸粘膜和大腸腺瘤之間有明顯的差異，大腸腺瘤中Gli1的表達(dá)明顯高于正常大腸粘膜(p<0.05)，而大腸腺瘤組織中Gli1表達(dá)與大腸癌組織中Gli1的表達(dá)沒有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；
　　 2.Gli1蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡、病理類型、分化程度、腫瘤部位、腫瘤TNM分期均無明顯相關(guān)(p>0.05)；
　　 3.Gli1的蛋白表達(dá)與腫瘤的浸潤深度相關(guān)，其中

12、侵犯至肌層的腫瘤Gli1的表達(dá)量高于其他各組(p<0.05)。
　　 三、大腸癌及癌前病變中SuFu與Gli1蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析
　　 研究結(jié)果顯示正常大腸粘膜向大腸癌發(fā)展的過程中，Gli1的表達(dá)呈現(xiàn)出逐漸增加的趨勢，而SuFu的表達(dá)則呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢，兩者之間的表達(dá)表現(xiàn)為顯著負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(R=-0.240，p<0.05)。
　　 四、SuFu及Gli1蛋白與大腸癌患者預(yù)后關(guān)系
　　 患

13、者的總生存期和無瘤生存期與Hh信號通路SuFu及Gli1蛋白表達(dá)相關(guān)。SuFu蛋白陰性表達(dá)患者總生存期及無瘤生存期均明顯低于陽性表達(dá)患者(p<0.05)；而Gli1蛋白陽性表達(dá)患者總生存期及無瘤生存期明顯低于陰性表達(dá)患者(p<0.05)。
　　 研究結(jié)論：
　　 1.Hh信號通路的異?；罨瘏⑴c了大腸癌癌變過程；
　　 2.大腸癌的腫瘤部位、腫瘤TNM分期、腫瘤浸潤深度可能與Hh信號通路的異?；罨嚓P(guān)；