華南虎遺傳起源和遺傳多樣性研究以及疑似虎爪鞘的分子鑒定.pdf

1、作為中國特有虎亞種，華南虎(P.t.amoyensis)的保護(hù)占有重要地位。本研究通過對來自湖南的兩張野生虎皮3.2Kb線粒體DNA序列分析，對華南虎的遺傳起源進(jìn)行探討，同時通過3.2Kb線粒體DNA和8個家貓的微衛(wèi)星位點，對圈養(yǎng)華南虎進(jìn)行遺傳多樣性分析，并且利用食肉目 Cyt b通用引物對來自廣東車八嶺自然保護(hù)區(qū)發(fā)現(xiàn)的一只疑似虎爪鞘進(jìn)行物種鑒定。
　　研究結(jié)果如下。
　　1）通過對不同虎組織樣品的DNA提取方法的比較優(yōu)化，

2、確定利用經(jīng)典酚-氯仿法加DNA IQTM系統(tǒng)試劑盒提純法提取皮張樣品 DNA，利用經(jīng)典酚-氯仿法提取肌肉樣品DNA,以及PCR緩沖液處理法提取毛發(fā)和糞便毛發(fā)DNA。
　　2）通過3.2Kb線粒體DNA序列進(jìn)行比較，湖南壺瓶山和岳麓山的兩個虎樣品與母系起源于貴州虎的譜系薄編號為333號的虎得到單倍型W3，與Luo（2004）年發(fā)表母系起源于貴州虎的來自重慶動物園的2只華南虎的線粒體單倍型（AMO1）一致，與其他虎種群均相距甚遠(yuǎn)，形成

3、獨立的一支。說明湖南和貴州地區(qū)虎具有區(qū)別于其他亞種虎的遺傳特性，可能代表真正華南虎種群。
　　3）利用mtDNA和微衛(wèi)星標(biāo)記對圈養(yǎng)華南虎種群的遺傳多樣性分析，10只虎到到4個單倍型（本研究檢測到的5只和Luo2004年發(fā)表的5只），單倍型多樣性和核酸多樣性分別為0.673±0.058和0.176％±0.0021%，在珍稀瀕危圈養(yǎng)種群中處于相對較高的水平，Tajima’s D中性檢驗得到不顯著負(fù)值；8個微衛(wèi)星位點對11只圈養(yǎng)華南虎分