優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿的經(jīng)皮給藥制劑研究.pdf

1、本文建立了馬錢(qián)子總生物堿(TAF)的提取方法和優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿(MTAF)的制備工藝?；诮M分中藥思想，從最毒成分士的寧入手，通過(guò)簡(jiǎn)單工藝除去大部分士的寧得到優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿以實(shí)現(xiàn)減毒增效，此外，還進(jìn)行了馬錢(qián)子總生物堿優(yōu)化前后化學(xué)成分的含量測(cè)定和指紋圖譜相關(guān)性研究，結(jié)果表明優(yōu)化前后士的寧與馬錢(qián)子堿占總生物堿的比例從1.76∶1降低到1∶2.76。優(yōu)化前后馬錢(qián)子堿含量基本不變，而士的寧除去了約75％，其他生物堿的組成和含量變化很小。并

2、采用急性毒性試驗(yàn)對(duì)靜脈注射馬錢(qián)子總生物堿和優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿后的毒性進(jìn)行研究，馬錢(qián)子總生物堿具有一定的毒性，其LD50為0.6330mg.kg-1，0優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿LD50達(dá)到3.0870mg.kg-1，毒性降低了近五倍。
　　 本文采用超濾法和高效液相色譜法對(duì)不同馬錢(qián)子生物堿（馬錢(qián)子堿、士的寧、總生物堿、優(yōu)化總堿）在大鼠血漿中的血漿蛋白結(jié)合率進(jìn)行測(cè)定。馬錢(qián)子堿和士的寧在與血漿蛋白具有中等強(qiáng)度的結(jié)合，馬錢(qián)子總生物堿和優(yōu)化總生

3、物堿中馬錢(qián)子堿與同濃度單體相比，蛋白結(jié)合率差異不大；總生物堿中士的寧與同濃度單體相比，蛋白結(jié)合率有所降低。
　　 對(duì)于毒劇藥而言，制成經(jīng)皮給藥制劑是比較安全的給藥方式，可以直接作用于患處，在確保療效的同時(shí)，顯著降低藥物毒性，使其更好地適用于臨床。因此本文以凝膠劑為載體，比較了馬錢(qián)子堿、士的寧、馬錢(qián)子總生物堿和優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿的鎮(zhèn)痛和抗炎效應(yīng)進(jìn)行比較：采用熱板法、醋酸扭體法、小鼠尾根加壓法來(lái)評(píng)價(jià)不同馬錢(qián)子生物堿類成分對(duì)小鼠熱刺激

4、性疼痛、化學(xué)刺激性疼痛和機(jī)械刺激性疼痛反應(yīng)的影響；以二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹法評(píng)價(jià)抗炎活性。結(jié)果表明總生物堿和士的寧無(wú)效，優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿在鎮(zhèn)痛、抗炎等方面均優(yōu)于其他三種生物堿，能夠?qū)崿F(xiàn)增強(qiáng)療效減。比較了在相同的馬錢(qián)子堿劑量下，馬錢(qián)子堿、總生物堿和優(yōu)化總生物堿凝膠劑局部外用給藥后小鼠的體內(nèi)吸收性質(zhì)和體外透皮性質(zhì)。結(jié)果表明，優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿中主要有效成分馬錢(qián)子堿的吸收最完全，能顯著提高馬錢(qián)子堿的透皮吸收，優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿凝膠劑的AUC

5、O-t是馬錢(qián)子堿凝膠劑的1.74倍，是馬錢(qián)子總生物堿凝膠劑的1.89倍，Cmax是馬錢(qián)子堿凝膠劑的2.09倍，是馬錢(qián)子總生物堿凝膠劑的2.42倍。總生物堿的體外透皮效果最強(qiáng)，其次是優(yōu)化總生物堿，說(shuō)明總生物堿中其他生物堿在游離狀態(tài)時(shí)對(duì)馬錢(qián)子堿的透皮性質(zhì)可能具有促進(jìn)作用。
　　 在前期研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步制備了優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿貼膏劑。采用紫外分光光度法測(cè)定制劑中優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿總量，采用HPLC測(cè)定制劑中馬錢(qián)子堿和士的寧的含量。

6、考察了優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿貼膏劑的體外透皮性質(zhì)，結(jié)果表明在24h內(nèi)優(yōu)化總堿貼劑中馬錢(qián)子堿能恒定、持續(xù)釋藥，累積透過(guò)百分率為(62.95±0.44)％，皮膚殘留量為(158.0±2.78)μg/g，貼劑殘留量為(75.2±3.11)μg/cm2。根據(jù)2010版《中國(guó)藥典》一部對(duì)優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿貼膏劑進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與初步穩(wěn)定性的研究，包括重量差異、黏附力測(cè)定、含膏量、賦型性、制劑初步穩(wěn)定性等，結(jié)果表明本品質(zhì)量穩(wěn)定、可控、穩(wěn)定性好。
　

7、　 以弗氏完全佐劑誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠模型，以扶他林乳劑為陽(yáng)性對(duì)照，考察了優(yōu)化馬錢(qián)子總生物堿貼膏劑高劑量組（48mg/kg）、中劑量組(24mg/kg)和低劑量組(12mg/kg)外用治療AA的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高劑量貼膏劑藥效最明顯，對(duì)AA大鼠原發(fā)性腫脹、繼發(fā)性腫脹、升高的巨噬細(xì)胞分泌的TNF-a水平、增強(qiáng)的T、B細(xì)胞增殖反應(yīng)（由LPS或ConA誘導(dǎo)）及關(guān)節(jié)病理形態(tài)改變等方面都有不同程度的改善作用，與模型組相比有顯著性差異，且可能不通過(guò)降低I