固相法合成丙型肝炎疫苗多肽工藝研究.pdf

1、本文以工業(yè)化生產(chǎn)為目的，研究了用Fmoc固相法人工合成丙型肝炎疫苗多肽(以下簡稱疫苗多肽)的生產(chǎn)工藝，比較了Wang樹脂和二氯三苯甲基樹脂(以下簡稱二氯樹脂)在固相合成中的的優(yōu)勢和劣勢，以及粗產(chǎn)物肽和目標肽的產(chǎn)率和純度；創(chuàng)造性的引入N<'α>-Dmb基團，提高了困難氨基酸Val的連接率；優(yōu)化了脫保護的策略以及切割試劑的選擇；通過質(zhì)譜鑒定分析所得目標多肽的分子量，用RP-HPLC進行粗肽的分析和純化，系統(tǒng)完整的建立了整套合成純化工藝路線及

2、相關(guān)的工藝參數(shù)，為后續(xù)的工業(yè)化生產(chǎn)奠定了堅實的基礎(chǔ)。采用該合成純化工藝路線，以二氯樹脂為載體，合成的粗肽產(chǎn)率達到了90.76％，純化后的目標肽產(chǎn)率為63.02％純度達到了98.5％，并實現(xiàn)了18克每批的合成量。二氯樹脂以其高效率、低成本、產(chǎn)品的高純度完全符合工業(yè)化生產(chǎn)疫苗多肽的各項經(jīng)濟技術(shù)指標。 1.文獻綜述部分，簡述了丙型肝炎疫苗的研究現(xiàn)狀，詳細介紹了多肽固相合成技術(shù)中的合成方法、分離純化與鑒定技術(shù)，最后概述了多肽類藥物的應用

3、情況與研究展望。 2.采用Fmoc固相法人工合成了疫苗多肽，比較了兩種樹脂在合成過程中的異同點，對合成過程中的幾個重要步驟和難點進行了優(yōu)化和改進，如針對困難氨基酸Val的連接，設計了引入N<'α>-Dmb基團的獨特合成策略，提高了連接率及切割效率，確定了合成工藝中相關(guān)的各項工藝技術(shù)參數(shù)。最后用二氯樹脂做為載體進行了18克每批的疫苗多肽合成。 3.用RP-HPLC進行粗肽的分析和純化，根據(jù)疫苗多肽的理化性質(zhì)采用乙腈-水的流