纖維蛋白原在牙周炎與冠心病相關(guān)機(jī)制中作用的研究.pdf

1、大量流行病學(xué)研究顯示，中、重度牙周炎與心血管疾病(cardiovasculardisease，CVD)，尤其是冠心病(coronary heart disease，CHD)高度相關(guān)，可能是CHD的危險(xiǎn)因素。但牙周炎與CVD流行病學(xué)相關(guān)性的生物學(xué)基礎(chǔ)尚不清楚。 凝血因子纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)g)，是急性期蛋白之一，在急性反應(yīng)期水平可升高2～10倍；且Fg水平的升高與Fgβ-455(G／A)基因多態(tài)性相關(guān)。研究

2、表明，血漿Fg水平升高與CHD的發(fā)生密切相關(guān)，是CHD事件重要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。牙周炎可能通過其炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子造成Fg合成增加、使循環(huán)Fg水平升高，從而影響CHD的發(fā)生發(fā)展。然而，F(xiàn)g可否作為聯(lián)系牙周炎與CHD的紐帶，目前尚無定論。中國人牙周炎與CHD的關(guān)系也未見報(bào)道。 研究發(fā)現(xiàn)，與CHD相關(guān)的主要是中、重度牙周炎，然而，牙周炎易感性及嚴(yán)重程度具有明顯的、無法以細(xì)菌差異來解釋的個(gè)體差異。目前認(rèn)為，遺傳因素在決定宿主

3、牙周炎易感性上起著重要作用。并且，牙周炎與CHD作為多因素疾病，很難以單一基因的變異解釋其發(fā)生。因此，對白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等炎癥性疾病候選基因之外的遺傳因素，如Fg等，進(jìn)行研究， 可能有利于更全面和深入地闡明牙周炎和CHD的發(fā)病機(jī)制。細(xì)菌感染及其引發(fā)的炎癥和免疫反應(yīng)，導(dǎo)致牙周組織破壞。研究顯示，F(xiàn)g分子含有RGD黏附肽序列，多種牙周致病菌表面結(jié)構(gòu)均可與Fg發(fā)生特異、高親和的結(jié)合，可能促進(jìn)細(xì)菌的黏附與定植。但Fg在慢性牙周炎

4、主要致病菌牙齦卟啉單胞菌(P.gingivalis)對口腔上皮細(xì)胞的黏附中的作用則未見報(bào)道。此外，F(xiàn)g的過度產(chǎn)生可使單核細(xì)胞分泌高水平促炎細(xì)胞因子，目前亦未見Fg對牙周炎患者中性多形核白細(xì)胞(PMN)分泌促炎細(xì)胞因子作用的研究。 本研究系統(tǒng)地分析了中國人慢性牙周炎與CHD的相關(guān)性及Fg水平和基因多態(tài)性在二者相關(guān)關(guān)系中的可能作用，F(xiàn)g對P.gingivalis黏附口腔上皮細(xì)胞、對PMN分泌促炎細(xì)胞因子的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 1

5、、校正了吸煙、糖尿病、血壓和體重的混雜后，本組研究的中國人中，CBD患者的牙周狀態(tài)較無CBD者差，中、重度慢性牙周炎患者發(fā)生CBD的危險(xiǎn)度較牙周健康者升高(OR=2.527，95％CI：1.011～6.319)；中、重度牙周炎和／或CHD者的血漿Fg水平顯著高于健康對照者。嚴(yán)重的牙周感染可能改變血漿Fg水平并影響CHD的發(fā)生發(fā)展，可能是其危險(xiǎn)因素之一。 2、校正了吸煙、系統(tǒng)性疾病、體重、年齡和性別的混雜作用后，中、重度慢性牙周炎

6、患者血漿Fg水平顯著高于牙周健康者，且Fg-β455 A等位基因的存在與Fg水平升高顯著相關(guān)；中、重度牙周炎患者Fg-β455 A等位基因頻率顯著高于牙周健康者，A等位基因攜帶者發(fā)生中、重度牙周炎的危險(xiǎn)度是不具有A等位基因者的3倍(OR=3.135，95％CI：1.341-7.331)，提不，F(xiàn)g-β455G／A基因多態(tài)性可能決定血漿Fg水平的升高，并影響個(gè)體的牙周炎易感性和嚴(yán)重程度；而牙周炎癥的加重又可能使Fg水平進(jìn)一步升高，從而影響

7、CHD的發(fā)生、發(fā)展。 3、P.gingivalis與口腔上皮KB細(xì)胞共同孵育后，加入Fg的各實(shí)驗(yàn)組P.gingivalis的黏附和內(nèi)化細(xì)菌量及細(xì)菌黏附和內(nèi)化率均顯著高于未加入Fg的對照組，且隨著加入Fg濃度的升高，黏附和內(nèi)化的細(xì)菌量顯著增加。提示，F(xiàn)g可以濃度依賴的方式促進(jìn)P.gingivalis對口腔上皮細(xì)胞的黏附，在牙周病發(fā)生發(fā)展中可能具有一定的病理作用。 4、不同存在形式的Fg與PMN相互作用后，PMN

8、分泌IL-1β和IL-8的量有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異，固著性Fg組PMN分泌IL-1β和IL-8的量顯著高于可溶性Fg組。提示，F(xiàn)g的存在形式對其與PMN間的相互作用有顯著影響，固著性Fg可能通過蛋白質(zhì)空間構(gòu)像改變、使β<,2>整合素集簇化等而使PMN活化并分泌IL-1β和IL-8，可溶性Fg則無此作用。 5、不同濃度的固著性Fg(0mg／ml，2mg／ml和10mg／m1)與PMN作用不同時(shí)間后，其IL-1β和IL-8分泌量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、顯著差異。加入Fg的各組分泌量顯著升高，10mg／ml組的分泌量高于2mg／ml組：且隨著作用時(shí)間的延長，IL-1β和IL-8分泌量逐漸升高。提示，固著性Fg可以劑量和時(shí)間依賴的方式促進(jìn)PMN分泌促炎細(xì)胞因子IL-1β和IL-8。而Fg的這種促分泌功能對重度牙周炎者的PMN作用更加強(qiáng)烈，與不同濃度Fg作用后，重度牙周炎患者PMN分泌IL-1β的量均顯著高于牙周健康者，而分泌IL-8的量亦有升高的趨勢。提示，重度牙周炎患者的PMN可能具有

10、“過度炎癥性反應(yīng)特征”。 綜上所述，中、重度慢性牙周炎患者血漿Fg水平升高，并且可能具有PMN的“過度炎癥性反應(yīng)特征”，發(fā)生CHD的危險(xiǎn)度較牙周健康者高，中、重度慢性牙周炎可能是CHD的危險(xiǎn)因素之一。急性期蛋白Fg可以濃度依賴的方式促進(jìn)P.gingivalis對口腔上皮細(xì)胞的黏附并促進(jìn)PMN分泌促炎細(xì)胞因子IL-1 β和IL-8，可能參與牙周炎的始動和組織破壞過程：而Fg-β455G／A基因多態(tài)性可能決定血漿Fg水平的升高，并使