燈臺(tái)樹對博萊霉素所致肺纖維化治療作用機(jī)理的研究.pdf

1、目的：肺纖維化是一種嚴(yán)重的肺部疾病，是許多肺部疾病的共同結(jié)局。目前肺纖維化的發(fā)病呈上升趨勢，其發(fā)病原因各異，發(fā)病機(jī)制也不完全清楚，目前仍沒有令人滿意的治療方法。糖皮質(zhì)激素是目前治療肺纖維化的首選藥物，但它可以引起嚴(yán)重的免疫系統(tǒng)紊亂和骨代謝疾病。燈臺(tái)樹是一種少數(shù)民族常用的治療肺部感染的木本草藥。本實(shí)驗(yàn)的目的是用燈臺(tái)樹水煎液對博萊霉素(BL)誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性肺纖維化進(jìn)行干預(yù)，并觀察其對肺泡炎、肺纖維化的治療作用，初步探討其作用機(jī)理，試圖為臨床肺

2、纖維化的尋找新的藥物。 方法： （1）取未經(jīng)鑒定樹皮磨成細(xì)粉，將研細(xì)的粉末0.5g，加95％的乙醇15ml，加熱回流2 小時(shí)，放冷，轉(zhuǎn)至超聲波清洗機(jī)，超聲處理20 分鐘，濾過，濾液蒸干，加95％乙醇5ml 溶解，作為供試品溶液。另取燈臺(tái)葉對照標(biāo)準(zhǔn)藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以氯仿-甲醇（9：1）展開劑展開，取出，涼干，噴以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃下

3、加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。本品與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。 （2）SD成年大鼠48 只隨機(jī)分為4 組，每組12 只。雌雄各半。以5mg/kg(濃度10mg/ml)博萊霉素或等量的生理鹽水（正常對照組）氣管內(nèi)注射建立小鼠肺纖維化模型后，第二天始分別進(jìn)行生理鹽水、強(qiáng)的松和燈臺(tái)樹灌胃治療。分別于建模后7、14d 分2 批腹主動(dòng)脈放血處死各組動(dòng)物，迅速取肺，左葉肺制成組織勻漿進(jìn)行生化檢測，右葉肺投入10％甲醛中固定，常規(guī)包埋，

4、切片，進(jìn)行HE 染色，光學(xué)顯微鏡下觀察觀察肺泡炎的程度。 左肺組織勻漿后進(jìn)行超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、腫瘤壞死因子（TNF-α）含量檢測。 （3）小鼠40 只隨機(jī)分為4 組，每組10 只。雌雄各半。以5mg/kg(濃度10mg/ml)博萊霉素或等量的生理鹽水（正常對照組）氣管內(nèi)注射建立小鼠肺纖維化模型后，第二天始分別進(jìn)行生理鹽水、強(qiáng)的松和燈臺(tái)樹灌胃治療。分別于建模后90d 分脫臼

5、處死各組動(dòng)物，迅速取肺，左葉肺制成組織勻漿進(jìn)行生化檢測，右葉肺投入10％甲醛中固定，常規(guī)包埋，切片，進(jìn)行Masson、HE 染色，光學(xué)顯微鏡下觀察觀察肺泡炎的程度。左肺組織勻漿后進(jìn)行超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、腫瘤壞死因子（TNF-α）含量檢測。 結(jié)果： （1）色譜圖顯色結(jié)果可知，未經(jīng)鑒定的樹皮粉末和燈臺(tái)樹對照藥材標(biāo)準(zhǔn)品溶液在同一硅膠G 板上相應(yīng)的位置顯相同顏色的斑點(diǎn)，因此證明兩種

6、溶液含有眾多相同化學(xué)成分，即未經(jīng)鑒定的樹皮和對照標(biāo)準(zhǔn)品中含眾多相同化學(xué)成分，證實(shí)該未鑒定樹皮為燈臺(tái)葉樹皮。 （2）與博萊霉素對照組相比，燈臺(tái)樹組肺泡炎的程度均明顯減輕，將肺泡炎程度進(jìn)行等級轉(zhuǎn)化后進(jìn)行病理半定量分析表明，燈臺(tái)樹1g·kg－1 組和強(qiáng)的松治療組肺泡炎顯著減輕（P<0.01），燈臺(tái)樹治療組肺泡炎程度多呈0～2 級肺泡炎改變，強(qiáng)的松組多呈1～2 級肺泡炎改變；7d 時(shí)燈臺(tái)樹組肺組織勻漿MDA、TNF-α含量降低（P<0.

7、05），燈臺(tái)樹組、強(qiáng)的松組肺組織勻漿GSH含量升高（P<0.05）；14d 時(shí)燈臺(tái)樹劑量組、強(qiáng)的松組肺組織勻漿SOD活力、GSH 含量均增高（P<0.05），MDA 含量降低（P<0.05），燈臺(tái)樹組TNF-α含量降低（P<0.05）；90d 時(shí)燈臺(tái)樹治療組、強(qiáng)的松組肺組織勻漿TNF-α含量顯著低于模型組（P<0.05）和正常對照組（P<0.05）。燈臺(tái)樹治療組、強(qiáng)的松組肺組織勻漿MDA 含量顯著低于模型組（P<0.05）；燈臺(tái)樹治療組

8、、強(qiáng)的松組肺組織勻漿GSH 含量顯著高于模型組（P<0.05），此外，強(qiáng)的松組GSH 含量顯著高于燈臺(tái)樹治療組（P<0.05），也高于正常對照組（P<0.05）。 結(jié)論：本課題的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，燈臺(tái)樹和強(qiáng)的松均對博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺泡炎有治療作用。其中燈臺(tái)樹可使肺組織勻漿中TNF-α水平下調(diào)，減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，清除氧自由基并抑制其生成，并削弱炎癥反應(yīng)，減少炎癥細(xì)胞的滲出，在肺纖維化形成的早期發(fā)揮作用，提示其治療作用機(jī)理是通過抑制