姜黃素防治博萊霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(idiopathicpulmonaryfibrosis，IPF)，是指原因不明的慢性炎癥性間質(zhì)性肺疾病，以彌漫性肺泡炎、肺泡結(jié)構(gòu)紊亂和最終導(dǎo)致肺纖維化為特征，肺功能檢測(cè)表現(xiàn)為限制性通氣功能障礙及彌散功能障礙。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，病人的發(fā)病年齡通常在50-70歲之間，年發(fā)病率在萬分之7-10，平均存活率不到3年(自診斷為纖維化時(shí)起)，而且隨著年齡的增長(zhǎng)，其發(fā)病率和死亡率也升高。直至今日，IPF治療尚無特效藥物。因此，肺纖維

2、化已成為臨床治療的難點(diǎn)，研究肺纖維化發(fā)病機(jī)理和尋找行之有效的治療藥物是目前醫(yī)學(xué)界迫切需要解決的問題。 為探討姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠的防治作用，我們以博萊霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化為模型，從整體與分子水平闡明姜黃素的作用和作用機(jī)理，以期為臨床防治肺纖維化提供更準(zhǔn)確、科學(xué)地用藥提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 研究?jī)?nèi)容及結(jié)果1姜黃素防治肺纖維化的藥效學(xué)研究本實(shí)驗(yàn)研究姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠細(xì)胞外基質(zhì)和肺功能的影響SD雄性大鼠144只，分為假手術(shù)組，模型組

3、，姜黃素高，中，低劑量組，醋酸潑尼松組，每組24只。除假手術(shù)組外其余各組大鼠氣管內(nèi)一次性滴注鹽酸博萊霉素，假手術(shù)組大鼠氣管內(nèi)一次性滴注等體積的生理鹽水。造模后第1天開始給藥，持續(xù)到處死動(dòng)物的前一天。姜黃素高，中，低劑量組分別為200，100，50mg·kg-1·d-1，醋酸潑尼松組0.56mg·kg-1·d-1，假手術(shù)組，模型組分別灌服等體積的生理鹽水。各組動(dòng)物于7，14，28d測(cè)定大鼠肺功能后處死，分別觀察大鼠肺組織羥脯氨酸(HYP)

4、和血清中Ⅲ型膠原(Ⅲ-C)，Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)及層黏連蛋白(LN)和透明質(zhì)酸(HA)的含量，同時(shí)取肺組織進(jìn)行HE，Mallory染色。 結(jié)果表明：姜黃素可改善肺纖維化大鼠的肺功能，降低肺纖維化大鼠肺組織羥脯氨酸含量，降低肺纖維化大鼠血清中Ⅰ、Ⅲ型膠原、層粘連蛋白及透明質(zhì)酸含量，減輕肺組織纖維性增生。提示：姜黃素可能是通過降低肺纖維化大鼠細(xì)胞外基質(zhì)含量而發(fā)揮預(yù)防和治療肺纖維化作用。 2姜黃素防治肺纖維化作用機(jī)理的研究2.1

5、姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠氧自由基的影響通過姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠氧自由基水平影響的研究，探討姜黃素的作用機(jī)理。大鼠分組情況同實(shí)驗(yàn)研究1中分組。利用生化法測(cè)定大鼠肺組織超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)的含量。結(jié)果表明：模型組大鼠體內(nèi)氧自由基含量明顯升高。姜黃素能調(diào)節(jié)肺纖維化大鼠體內(nèi)與自由基相關(guān)的酶和產(chǎn)物的含量，三個(gè)劑量組中，姜黃素高、中劑量組調(diào)節(jié)體內(nèi)氧自由基的水平作用明顯。提

6、示：姜黃素能影響肺纖維化大鼠體內(nèi)的氧自由基水平。 2.2姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠TGF-β1的影響觀察姜黃素對(duì)大鼠肺組織TGF-β1的作用，探討其抗肺纖維化的作用機(jī)理。用western-blot和免疫組化的方法，研究姜黃素對(duì)肺組織TGF-β1的影響。肺組織來源于實(shí)驗(yàn)研究1。結(jié)果：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織TGF-β1的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化的機(jī)理之一在于調(diào)節(jié)肺組織蛋白中TGF-β1的活性。 2.3姜黃素對(duì)肺纖維化大

7、鼠肺組織CTGF的影響觀察姜黃素對(duì)TGF-β1下游因子CTGF的調(diào)節(jié)作用，以進(jìn)一步探討其抗肺纖維化的作用機(jī)理。用western-blot和免疫組化的方法，研究姜黃素對(duì)肺組織TGF-β1的影響。肺組織來源于實(shí)驗(yàn)研究1。結(jié)果表明：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織蛋白中CTGF的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化的機(jī)理之一在于調(diào)節(jié)肺組織蛋白中CTGF的活性。 2.4姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠NF-κB和IκBα的影響觀察姜黃素對(duì)肺纖維化大鼠肺組織N

8、F-κB和IκBα的影響，探討其抗肺纖維化的作用機(jī)理。肺組織來源于實(shí)驗(yàn)研究1。實(shí)驗(yàn)方法采用western-blot和免疫組化的方法，研究肺組織蛋白中NF-κB和IκBα的活性。結(jié)果表明：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織核蛋白中NF-κB含量，升高胞漿蛋白中IκBα的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化作用機(jī)理之一在于調(diào)節(jié)肺組織蛋白中NF-κB和IκBα的含量。 結(jié)論1姜黃素能改善肺纖維化大鼠肺功能，調(diào)節(jié)博萊霉素引起肺纖維化大鼠細(xì)胞外基質(zhì)的

9、含量，降低肺組織炎癥和纖維化的程度，而發(fā)揮預(yù)防和治療肺纖維化的作用。 2姜黃素抗肺纖維化的作用機(jī)理2.1調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)氧自由基水平，減輕氧自由基對(duì)肺組織結(jié)構(gòu)的損傷。 2.2調(diào)節(jié)肺組織蛋白TGF-β1的活性。 2.3調(diào)節(jié)肺組織蛋白CTGF的活性。 2.4調(diào)節(jié)肺組織蛋白IκBα的活性，進(jìn)而抑制NF-κB活性。 總之，姜黃素具有防治肺纖維化的作用。其作用機(jī)理可能在于通過升高肺組織IκBα的活性，降低NF-