白介素17對(duì)慢性心衰大鼠心肌JAK2水平的影響.pdf

1、目的：心力衰竭(heart failure，HF)被預(yù)言為心血管疾病21世紀(jì)的世界性難題，其存活率很低，五年的存活率與惡性腫瘤相似。近年來(lái)許多研究顯示，有多個(gè)信號(hào)通路在心力衰竭的過(guò)程中起著重要的作用，其中JAK-STAT信號(hào)通路在心臟疾病發(fā)病機(jī)制中的作用逐漸引起人們的關(guān)注。JAK-STAT信號(hào)通路可以被多種細(xì)胞因子及非免疫性生物化學(xué)遞質(zhì)所激活，啟動(dòng)相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄，激活代償性的心肌肥大和細(xì)胞生存的相關(guān)基因。本實(shí)驗(yàn)擬從JAK-STAT通路方

2、面研究IL-17在心力衰竭過(guò)程中的作用，探索IL-17是否可能通過(guò)參與JAK-STAT。通路引起大鼠心肌肥大、心肌重塑，在心力衰竭過(guò)程中發(fā)揮作用：應(yīng)用IL-17抗體是否可以通過(guò)干擾JAK-STAT通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)影響心肌重塑，從而延緩心衰的發(fā)生和發(fā)展；阿霉素誘導(dǎo)心衰大鼠的心肌組織中p-JAK2/t-JAK水平的變化。從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的角度探討心力衰竭發(fā)生的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，了解心力衰竭的發(fā)病發(fā)展的過(guò)程為心力衰竭的治療開(kāi)拓新的理論視角，提供新的理論依

3、據(jù)。
　　 方法：健康雄性wistar大鼠24只，體重(200±20)g。采用隨機(jī)分組發(fā)分為4組，A：抗IL-17心衰組(n=6)；B：IgG心衰組(n=6)；C：心衰對(duì)照組(n=6)：D：空白對(duì)照組(n=6)。A、B、C三組為阿霉素誘導(dǎo)心衰模型組，制備方法為：阿霉素用生理鹽水配制成2mg/ml溶液，腹腔注射，共給藥8次。分別于第2、4dADR1mg/kg.ip，第6、8dADR2mg/kg.ip，第10、12d ADR3mg/

4、kg.ip，第14、16d ADR4mg/kg.ip，累計(jì)20mg/kg；D：注射相同體積的生理鹽水。干預(yù)措施：A組：抗大鼠IL-17抗體腹腔注射(100μg/0.8m1PBS，然后注射0.2ml的空氣以確保所有的抗體擴(kuò)散至整個(gè)腹腔)；B組：同型IgG腹腔注射(100μg，0.8mlPBS)；C、D組：腹腔注射0.8ml PBS。以上操作分8次進(jìn)行，于每次給藥后注射(0.1ml/次)，給藥后注射0.2ml的空氣以確保所有的抗體擴(kuò)散至整個(gè)

5、腹腔。判斷指標(biāo)：每天觀察行為體征，進(jìn)行體重測(cè)量。末次注射后24h，超聲心動(dòng)學(xué)監(jiān)測(cè)各組大鼠的室間隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(IVPWT)及射血分?jǐn)?shù)(EF)，記錄數(shù)據(jù)并進(jìn)行比較。超聲心動(dòng)學(xué)監(jiān)測(cè)后，大鼠稱(chēng)重麻醉，觀察心臟、肺、肝臟及腎臟的形態(tài)學(xué)變化。取出心臟，計(jì)算心臟重量指數(shù)，部分心肌組織制作病理切片。部分心肌組織快速冷凍。液態(tài)氮-80℃保存，Western blot測(cè)定p-JAK2/t-JAK2表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)心房利鈉肽(AN

6、P)相對(duì)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果：運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：A、B、C三組均出現(xiàn)不同程度的心衰現(xiàn)象，D組正常生長(zhǎng)。A、B、C、D四組終末體重均增加，D組增加明顯(P<0.05)。超聲心動(dòng)學(xué)監(jiān)測(cè)：IVST：A、B、C組比D組明顯增厚(P<0.05)；LVPWT：C組較抗A、B、D組明顯增厚(P<0.05)；EF：A、B、C組比D組明顯下降(P<0.05)。心臟質(zhì)量：A、B、C組較D組無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.

7、05)。心臟重量指數(shù)：A、B、C組大于D組(P<0.05)，A組略小于C組(P<0.05)；B、C兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。心肌病理改變：A、B、C三組均出現(xiàn)不同程度的心肌損害，D組表現(xiàn)正常。Western blot測(cè)定心肌組織內(nèi)p-JAK2/t-JAK2：D組中p-JAK2/t-JAK2少量表達(dá)，A、B、C較D組明顯增加，C組較A組、B組明顯下降。RT-PCR檢測(cè)ANP相對(duì)水平：A、B、C組較D組無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.