清熱養(yǎng)陰法治療糖尿病周圍神經(jīng)病變的研究.pdf

1、糖尿病周圍神經(jīng)病變(Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN)為2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus，T2DM)患者最常見并發(fā)癥之一，其病變的發(fā)展標(biāo)志著T2DM本身的發(fā)展及多系統(tǒng)損害的加劇，對(duì)本病病理變化的探索及中醫(yī)藥治療本病的機(jī)理研究是近年來本領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。我們通過理論探索和臨床實(shí)踐，提出DPN的病機(jī)要點(diǎn)在于中焦熱盛、流竄經(jīng)絡(luò)、陰液受損、經(jīng)絡(luò)失養(yǎng)，其病位在于經(jīng)絡(luò)；由于其基本病機(jī)

2、與消渴基本一致，因此以“清熱養(yǎng)陰”為基本治療大法；以本法為組方原則的王燦暉降糖基本方為實(shí)驗(yàn)方劑，通過理論研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察本法治療DPN的療效，并探討其作用機(jī)理。
　　 理論研究
　　 ①根據(jù)大量的文獻(xiàn)記載，歸納古代醫(yī)家對(duì)本病的描述，總結(jié)古代醫(yī)家對(duì)本病的病因、病機(jī)、辨治規(guī)律的認(rèn)識(shí)。
　　 ②結(jié)合現(xiàn)代研究對(duì)本病的認(rèn)識(shí)，闡述對(duì)本病病因、病理、治療、預(yù)后的研究成果。
　　 ③從DPN的基本病機(jī)出發(fā)，對(duì)本病的基

3、本治法—清熱養(yǎng)陰法進(jìn)行闡述。
　　 ④結(jié)合臨床病例，闡述清熱養(yǎng)陰法代表方劑——王燦暉降糖基本方組方依據(jù)、用藥特色、隨證加減、及其在治療DPN中的運(yùn)用。
　　 實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：
　　 觀察清熱養(yǎng)陰法代表方劑——王燦暉降糖基本方對(duì)T2DM所致DPN大鼠模型的治療作用及其對(duì)坐骨神經(jīng)內(nèi)相關(guān)性基因表達(dá)的影響，探討DPN的發(fā)病機(jī)制，揭示清熱養(yǎng)陰法治療DPN的作用機(jī)理，初步探索藥效作用靶點(diǎn)，為臨床深入研究和推廣運(yùn)

4、用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：
　　 選用雄性SD大鼠，通過一次性小劑量注射鏈脲佐菌素(STZ)配合高糖高脂飲食復(fù)制DPN大鼠模型，運(yùn)用生化、電生理、光鏡、免疫組化、華聯(lián)ROA1.1大鼠全基因組表達(dá)譜芯片、RT-PCR等檢測(cè)手段和方法，觀察王燦暉降糖基本方對(duì)DPN模型大鼠一般狀況、空腹血漿C肽水平、熱刺激反應(yīng)閾值、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度、坐骨神經(jīng)形態(tài)、NGF、TrkA表達(dá)的影響，并且通過聚類分析從坐骨神經(jīng)組織mRNA表達(dá)譜中篩

5、選出和DPN發(fā)病密切相關(guān)的PLA2G2A mRNA表達(dá)調(diào)控的影響。
　　 結(jié)果：
　　 (1)DPN大鼠模型復(fù)制成功。
　　 (2)用藥1月后，王氏降糖方能顯著降低DPN大鼠血糖水平，但和模型組相比并未減少空腹血漿C肽水平。
　　 (3)和模型組相比，王氏降糖方能顯著提高大鼠熱刺激反應(yīng)閾值(p＜0.001)。
　　 (4)和模型組相比，王氏降糖方能顯著提高大鼠SNCV(p＜0.001)，但各組MN

6、CV無顯著差異。
　　 (5)光鏡檢查HE染色顯示：王氏降糖方減輕DPN大鼠坐骨神經(jīng)干的病理?yè)p傷，改善神經(jīng)功能，減輕DPN癥狀。
　　 (6)王氏降糖方能提高DPN大鼠坐骨神經(jīng)干NGF表達(dá)，但對(duì)TrkA的表達(dá)無顯著影響。
　　 (7)對(duì)DPN大鼠坐骨神經(jīng)組織基因表達(dá)譜篩查結(jié)果顯示：與模型組相比，王氏降糖方能治療組的坐骨神經(jīng)組織基因表達(dá)上調(diào)204條，下調(diào)104條；其中多條基因與花生四烯酸代謝、過氧化物酶體增殖物激活

7、受體信號(hào)傳導(dǎo)、抗氧化作用有關(guān)。
　　 (8)通過RT-PCR檢測(cè)顯示：DPN大鼠坐骨神經(jīng)組織PLA2G2A mRNA基因在模型組表達(dá)上調(diào)，經(jīng)王氏降糖方治療后表達(dá)下調(diào)。
　　 結(jié)論：
　　 DPN模型大鼠坐骨神經(jīng)受損的分子調(diào)控機(jī)制和多條基因的表達(dá)調(diào)控有關(guān)，PLA2G2A mRNA的過度表達(dá)是其痛閾值降低、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度降低、坐骨神經(jīng)形態(tài)改變的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以清熱養(yǎng)陰法為主要治法能改善血糖水平、提高痛閾值、提高神經(jīng)傳導(dǎo)