簇毛麥基因組新的特異重復(fù)序列的分離、鑒定和應(yīng)用.pdf

1、簇毛麥屬(Dasypyrum,又稱 Haynaldia)在植物分類上屬禾本科(Gramineae)小麥族(Triticeae)的小麥亞族(Triticinae),是小麥的近緣屬之一。具有抗白粉病,抗葉銹病和稈銹,抗全蝕病,分蘗力強(qiáng),小穗數(shù)多,耐旱耐寒,耐鹽和蛋白質(zhì)含量高等許多栽培小麥所需要的有利性狀,是小麥性狀、品質(zhì)改良的重要遺傳資源。簇毛麥屬包括2個(gè)物種：二倍體簇毛麥D. villosum(L.) Candargy和四倍體多年生簇毛麥

2、 D. breviaristatum(Lindb. F.) Frederiksen。目前，對(duì)二倍體簇毛麥的研究和利用相對(duì)較多，已經(jīng)創(chuàng)制了幾套硬粒小麥或普通小麥-二倍體簇毛麥異附加系與代換系，進(jìn)而把來自染色體6V上的抗白粉病基因Pm21和染色體4V上的抗眼斑病基因PchDv以及和抗小麥梭條花葉病基因Wss1導(dǎo)入到小麥中。最近我們?cè)诶盟拇ㄞr(nóng)業(yè)大學(xué)蔣華仁等率先在國(guó)內(nèi)外合成的多年生簇毛麥-小麥的雙二倍體的基礎(chǔ)上，開展了將多年生簇毛麥這一珍貴物

3、種的優(yōu)異基因?qū)胄←湹难芯抗ぷ鳎b定出一批導(dǎo)入多年生簇毛麥有利性狀的優(yōu)異資源并選育了一批具有多年生簇毛麥染色質(zhì)的中間材料，建立了多個(gè)能夠檢測(cè)簇毛麥染色質(zhì)的RAPD、SSR和SCAR分子標(biāo)記，豐富了簇毛麥基因資源在小麥中的應(yīng)用的實(shí)踐。
　　隨著遠(yuǎn)緣雜交將小麥族植物優(yōu)異基因?qū)胄←湹娜旧w工程育種的進(jìn)行，有效地檢測(cè)與跟蹤外源染色質(zhì)顯得十分重要。建立在DNA序列基礎(chǔ)上的分子標(biāo)記RAPD和SCAR技術(shù)以其準(zhǔn)確、快捷、不受植物生長(zhǎng)時(shí)期的限制

4、、成本低等優(yōu)點(diǎn)被廣泛的運(yùn)用，特別在建立染色體特異性標(biāo)記、基因組特異性標(biāo)記和物種特異性標(biāo)記上具有其他分子標(biāo)記不可比擬的優(yōu)點(diǎn)。本論文的研究結(jié)果如下：
　　1、利用RAPD技術(shù)篩選出的高度重復(fù)序列（OPM2937）設(shè)計(jì)特異PCR引物對(duì)含簇毛麥染色質(zhì)的材料以及對(duì)照組多個(gè)小麥進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果顯示，所有含簇毛麥染色質(zhì)的材料均能擴(kuò)增出目標(biāo)片段，而對(duì)照組小麥均未擴(kuò)增出目標(biāo)片段。對(duì)一套中國(guó)春-簇毛麥附加系(Chinese Spring-D. vi

5、llosum additions，CSDA1V-CSDA7V）的擴(kuò)增結(jié)果表明 CSDA1V-CSDA7V均能擴(kuò)增出目標(biāo)片段，表明OPM2937存在于簇毛麥全套染色體上。簇毛麥后代Y93-1-31等都能夠擴(kuò)增出約目標(biāo)條帶，表明該特異引物不僅可以用于鑒定簇毛麥，而且可以鑒定簇毛麥的后代。該標(biāo)記可以作為多年生簇毛麥基因組的特異分子標(biāo)記檢測(cè)導(dǎo)入到小麥背景中的多年生簇毛麥染色質(zhì)。
　　2、以中國(guó)春基因組總DNA為封阻，以O(shè)PM2937為探針