補(bǔ)腎健脾固沖方對(duì)子宮內(nèi)膜增生大鼠模型VEGF,BAX,BCL-2作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本課題以中醫(yī)理論為基礎(chǔ)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，建立子宮內(nèi)膜增生大鼠模型，用補(bǔ)腎健脾固沖中藥進(jìn)行干預(yù)，通過(guò)觀察補(bǔ)腎健脾固沖方對(duì)子宮內(nèi)膜增生大鼠子宮局部活性物質(zhì) VEGF,BAX,BCL-2含量的影響，分析補(bǔ)腎健脾中藥對(duì)子宮局部微環(huán)境的影響，進(jìn)而探討補(bǔ)腎健脾中藥治療青春期功血的作用機(jī)理，為臨床治療青春期功血提供更為開(kāi)闊的治療思路。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)選用 SD幼年雌性大鼠為研究對(duì)象，卵巢去勢(shì)后雌激素刺激建立子宮內(nèi)膜增生模型，以戊酸

2、雌二醇、中藥補(bǔ)腎健脾固沖方、醋酸甲羥孕酮片和宮血停顆粒為實(shí)驗(yàn)用藥。將90只未成年雌性大鼠于30日齡,體重90±10g行卵巢摘除手術(shù)，其中15只大鼠為假手術(shù)組僅行開(kāi)關(guān)腹術(shù)，術(shù)后注射青霉素三天預(yù)防感染，連續(xù)五天涂大鼠陰道脫落細(xì)胞，無(wú)角化細(xì)胞即手術(shù)成功。手術(shù)成功的大鼠隔天灌服戊酸雌二醇共45天，病理提示大鼠子宮內(nèi)膜增生即為造模成功。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為5組，即模型組、西藥組、宮血停組、補(bǔ)腎健脾固沖方高、低劑量組，每組15只。
　　在

3、同種飼養(yǎng)條件下，對(duì)造模成功的大鼠灌服實(shí)驗(yàn)用藥，假手術(shù)組和模型組給予等體積去離子水灌服，宮血停組灌以宮血?；鞈乙?2g/kg（濃度約0.6g/ml）、西藥組灌以醋酸甲氫孕酮混懸液2mg/kg（濃度約0.1mg/ml）、中藥高、低劑量組分別灌以補(bǔ)腎健脾固沖方煎劑，高劑量15 g/kg（生藥濃度約1.5g/ml）、低劑量7.5 g/kg（生藥濃度約0.75g/ml），分別相當(dāng)于臨床劑量的6.7倍、3.35倍，連續(xù)灌藥30天后處死，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)

4、。大鼠左側(cè)子宮用多聚甲醛固定，再脫水包埋,用 HE染色法染色,免疫組化法檢測(cè)子宮局部 VEGF和BAX,BCL-2的表達(dá)。全部數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析均在 SPSS18.0軟件的支持下實(shí)現(xiàn)。
　　結(jié)果：（1）實(shí)驗(yàn)各組大鼠子宮內(nèi)膜增生情況改善，局部細(xì)胞層次減少。（2）補(bǔ)腎健脾固沖方能使子宮內(nèi)膜 VEGF表達(dá)明顯升高（P<0.05）；（3）補(bǔ)腎健脾固沖方能使子宮內(nèi)膜 BAX表達(dá)明顯升高（P<0.05），BCL-2表達(dá)明顯降低（P<0.05），B

5、AX/BCL-2比值顯著升高(P<0.05，且 P＜0.01)。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)證明了中藥補(bǔ)腎健脾固沖方能提高子宮局部 VEGF的表達(dá)，從而達(dá)到修復(fù)內(nèi)膜血管，止血的目的；通過(guò)上調(diào) BAX/BCL-2的比值，促使異常增生的子宮內(nèi)膜細(xì)胞凋亡，達(dá)到改變子宮內(nèi)膜過(guò)度增生的病理狀態(tài)。提示補(bǔ)腎健脾固沖方具有調(diào)節(jié)子宮局部活性因子的作用，為本方可改善局部微環(huán)境的作用機(jī)理提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為臨床運(yùn)用補(bǔ)腎健脾固沖法治療青春期無(wú)排卵性功血提供了理論支